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細(xì)胞生長過程期間介紹2025/5/14

細(xì)胞生長過程：游離期；貼壁期；潛伏期；對數(shù)生長期；停止期（平臺期）1.游離期：細(xì)胞接種后在培養(yǎng)基中呈懸浮狀態(tài)，也稱懸浮期。此時(shí)細(xì)胞質(zhì)回縮，胞體呈圓球形（10min-5h）。2.貼壁期：細(xì)胞附著于底物上...

聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)循環(huán)參數(shù)分析2025/5/6

聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)是在體外進(jìn)行的由引物介導(dǎo)的酶促DNA擴(kuò)增反應(yīng)。PCR的原理是在模板DNA、PCR引物、四種脫氧核糖核苷酸(dNTP)及適當(dāng)濃度的Mg2+存在的條件下，依賴于DNA聚合酶的體外...

蛋白質(zhì)免疫印跡(wb)的實(shí)驗(yàn)步驟2025/4/27

Westernblot（也稱為蛋白質(zhì)免疫印跡）是一種常用于研究中分離和鑒定蛋白質(zhì)的技術(shù)。它利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)來分離指定樣品中包含的各種蛋白質(zhì)，然后將分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝...

ELISA標(biāo)準(zhǔn)品正確溶解與稀釋2025/4/21

正確溶解與稀釋ELISA標(biāo)準(zhǔn)品ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子，標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn)。怎樣正確溶解、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品呢？1.粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心，讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。2...

細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基的方法2025/4/14

細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基的方法：1.直接適應(yīng)——細(xì)胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基（SFM）中。一些類型細(xì)胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。對于直接適應(yīng)，接種細(xì)胞密度應(yīng)該:2.5×105~...

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備一般步驟2025/4/7

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備是一個(gè)關(guān)鍵的過程，確保其質(zhì)量和可追溯性。下面是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備一般步驟：1、確定目標(biāo)物質(zhì)和純度要求：確定所需的目標(biāo)物質(zhì)以及其純度要求。這可能涉及從商業(yè)供應(yīng)商購買純品，從自然來源提取物質(zhì)，或...

PCR反應(yīng)的三個(gè)基本步驟介紹2025/3/31

PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性-退火-延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：1、模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后...

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)簡介2025/3/24

熒光定量PCR也叫Real-TimePCR，是美國PE（PerkinElmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。熒光定量PCR的發(fā)展史是一部ABI、羅氏和伯樂等的蕩氣回腸的斗爭史，感興趣...

抗體依據(jù)重鏈抗原性分類及其主要功能2025/3/17

抗體依據(jù)重鏈抗原性的不同分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。各類抗體主要功能有：IgG：血清中含量最高，因此是最重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG還能激活補(bǔ)體，結(jié)合并增...

細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)原理是什么？2025/3/11

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象，在多細(xì)胞生物去除不需要的或異常的細(xì)胞中起著必要的作用。它在生物體的進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及多個(gè)系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。細(xì)胞凋亡不僅是一種特殊的細(xì)胞死亡類型，而且具...

實(shí)驗(yàn)室試劑貯存應(yīng)注意什么？2025/3/3

實(shí)驗(yàn)室試劑貯存應(yīng)注意點(diǎn)：一、避光其實(shí)在實(shí)驗(yàn)室中很多化學(xué)試劑見強(qiáng)光都極易揮發(fā)變質(zhì)，所以為避免試劑受到光的輻射，應(yīng)采用棕色玻璃瓶，外用黑紙包裹，并貯藏于暗室或遮光的試劑柜中。避光保存適用于能進(jìn)行光化學(xué)反應(yīng)...

ELISA試劑盒包被用抗原解析2025/2/24

ELISA試劑盒包被用抗原解析：用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養(yǎng)物等，須經(jīng)提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶...

微生物培養(yǎng)基配置一般過程2025/2/17

培養(yǎng)基(culturemedium)是人工配制的，適合微生物生長、分離鑒別的營養(yǎng)基礎(chǔ)。一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養(yǎng)物質(zhì)。微生物培養(yǎng)基應(yīng)用范圍很廣。例如，無菌試...

胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用2025/2/10

新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡稱NBCS）：采自出生一天一周內(nèi)的新生牛；胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用：1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分...

PCR反應(yīng)條件優(yōu)化2025/2/5

1.變性：在第一輪循環(huán)前,在94℃下變性5-10min非常重要,它可使模板DNA全解鏈,然后加入TaqDNA聚合酶(hotstart),這樣可減少聚合酶在低溫下仍有活性從而延伸非特異性配對的引物與模板...