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實時熒光定量PCR技術方法探討2023/10/30

根據所使用的技術不同，實時熒光定量PCR可以分為：熒光探針和熒光染料兩種方法。現將其原理簡述如下：1.TaqMan熒光探針TaqMan探針法是高度特異的定量PCR技術，其核心是利用Taq酶的3'→5'...

ELISA檢測試劑盒操作過程注意事項2023/10/23

ELISA檢測試劑盒操作過程注意事項：1加樣：①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經常校正其準確性，...

渾濁紅球菌的培養2023/10/17

渾濁紅球菌的培養：1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業發酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。2、挑選具有...

細胞傳代密度問題與解決方案2023/10/8

細胞傳代密度問題與解決方案：1.傳代密度過高一旦細胞養太久至融合度過高（90%）才傳代，容易使細胞產生老化現象，甚至是堆疊，再消化細胞時不易吹打成單顆細胞，即便再重新鋪盤傳代，細胞也無法回到原本的特性...

?單克隆抗體與多克隆抗體對比2023/10/3

單克隆抗體（monoclonalantibody,mAb）：就是指由單一B細胞（其基因僅能編碼一種抗體）克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。單克隆抗體是通過將抗原注入到宿主動物體內啟動機...

實時熒光定量 PCR (RT-qPCR）實驗之RNA提取2023/9/25

實時熒光定量PCR(RT-qPCR）實驗過程中，RNA的提取是參照全式金生物的Transzolup提取試劑盒完成的。1、離心機4℃預冷，準備試劑：氯仿、異內醇、75%乙醇（用DEPC水配制）、無RNa...

賴氨酸(Lys)含量測定試劑盒Lys含量計算2023/9/11

測定原理：蛋白質中的賴氨酸(lysine，Lys)具有一個游離的ε-NH2，它與茚三酮試劑反應生成藍紫色物質，其顏色的深淺在一定范圍內與賴氨酸的含量成線性關系。亮an酸與賴氨酸的碳原子數目相同，而且僅...

I型膠原單克隆抗體穩定性良好原因2023/8/28

抗體在室溫、37℃保存與-20℃保存具有一樣的活性與穩定性。之所以這種抗體具有這樣良好的穩定性，主要原因有四個方面：1.抗體純度高純度的抗體產品，去除了包括各種蛋白酶在內的雜質，保證了抗體的穩定性。采...

ELISA的檢測收集標本注意事項2023/8/21

ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。ELISA的檢測目的是為了實驗提供...

ELISA試驗樣本實驗前準備2023/8/17

樣本實驗前準備：ELISA進口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。1、血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清...

配置常用細胞培養配套試劑詳述2023/8/7

幾種常用細胞培養配套試劑的配置(緩沖液、平衡鹽溶ye等)。1、無鈣、鎂、離子溶液(1000ml)氯化鈉(NaCl)8g磷酸二氫na、(NaH2PO4H20)0.05g、碳酸氫na(NaHCO3)1g、...

生化液體型試劑解析2023/8/1

無論是單試劑還是雙試劑型試劑，目前乃至今后仍以液體型為主要劑型。其優點是液體型試劑的試劑組分高度均一，瓶間差異小，測定重復性好而且使用方便；它也無需加入輔助試劑及蒸餾水，防止了外源性水質對試劑的影響，...

PCR對照實驗結果好，目的片段不理想分析2023/7/17

對照實驗結果好，卻沒有回收到目的片段，實驗出了什么問題？參考見解：1連接用室溫保溫1小時，能滿足大多數克隆，為提高效率，需4oC過夜。2插入片段帶有污染，使3`-T缺失，或抑制連接，抑制轉化。為此，將...

?菌種的培養分析2023/7/10

菌種的培養：1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業發酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。2、挑選具有某種能...

ELISA試劑盒特異性影響因素2023/6/26

ELISA試劑盒特異性影響因素：1、固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板最為常見。它具有良好的吸附性能，孔底透明度高，空白值低，各板之間、同一板各孔之...