正確溶解與稀釋ELISA標準品

ELISA標準曲線是結果計算的尺子，標準品是ELISA 實驗成功與否的關鍵點。怎樣正確溶解、稀釋標準品呢？

1. 粉末標準品短暫離心，讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。

2. 根據瓶標簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解 10-30min，讓粉末全溶解。

注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。

3. 標準品梯度稀釋:

（1）標準品稀釋液的選擇：

若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標準品稀釋液，梯度稀釋標準品。

若細胞上清樣本，建議用細胞培養基梯度稀釋標準品。

（2）耗材準備：準備8個1.5Ml離心管，寫上S1-S7、空白。

（3）梯度稀釋：根據說明書，每管加入等體積的標準品稀釋液（培養基）。吸取同體積溶解好的標準品到S1管中，吹打10次混勻，渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管，吹打10次混勻，渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。

（4）空白: 標準品稀釋液（培養基）作為空白即零濃度。

注意：梯度稀釋標準品時，渦旋震蕩混勻后可短暫離心，讓到蓋子、壁上的液體到管底，再開始稀釋下個濃度。