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海洋微生物菌種保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)2018/04/08
海洋微生物菌種保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):(1)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒
林業(yè)菌種試驗(yàn)影響標(biāo)本處理因素2018/04/02
林業(yè)菌種試驗(yàn)影響標(biāo)本處理因素1、操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。3、手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在
生物菌種操作中應(yīng)注意以下相關(guān)事項(xiàng)2018/03/28
生物菌種操作中應(yīng)注意以下相關(guān)事項(xiàng):1、嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。2、使用加液器加液,加液頭不能混用。3、在測(cè)量過程中,請(qǐng)勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手。4、洗板要洗干凈,如果條件允許,使用洗板機(jī)洗板,避免交叉污染。5、請(qǐng)勿將樣品灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請(qǐng)洗手。6、對(duì)于因試劑盒問題造成事宜,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù),以達(dá)到效果。7、不要在測(cè)量過程中關(guān)閉電源。8、使用后蓋好防塵罩。各項(xiàng)性能指標(biāo)綜述:A、在貯存和孵育過程中應(yīng)避免將試劑盒暴露在強(qiáng)光下,或在強(qiáng)光下進(jìn)行
海洋微生物菌種制備方法步驟2018/03/23
海洋微生物菌種制備方法步驟(1)秋水仙素處理:取骨髓前3h先給小鼠腹腔注入秋水仙素,注射劑量為100μg/kg動(dòng)物體重。(2)取骨髓:用損傷脊髓法處死小鼠,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉,取出大腿骨,用一小塊紗布搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關(guān)節(jié)頭,然后用注射器吸取5ml0.85%生理鹽水,插入股骨一端,將骨髓細(xì)胞沖洗至10ml的離心管中。可重復(fù)沖洗多次,直至骨髓腔呈白色為止。(3)低滲處理:將所獲得的細(xì)胞懸浮液以1000rpm離心10min,吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加0
林業(yè)菌種檢測(cè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)流程2018/03/21
林業(yè)菌種檢測(cè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)流程為取得測(cè)定效果,在用單管的熒光測(cè)定儀測(cè)定時(shí),樣品和測(cè)定試劑混合后到測(cè)定前的時(shí)間應(yīng)盡量控制在相同時(shí)間內(nèi),例如30秒內(nèi)。由于溫度對(duì)酶反應(yīng)有影響,所以測(cè)定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測(cè)定。為保證熒光素酶檢測(cè)試劑的穩(wěn)定性,可以采取適當(dāng)分裝后避光保存的方法,以避免反復(fù)凍融和長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫。一般來說,如果不分裝使用三次(期間凍融三次),對(duì)測(cè)定結(jié)果無明顯影響。樣品和測(cè)定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定時(shí)間通常為10秒,根據(jù)情況也可以測(cè)定更長(zhǎng)或更短時(shí)間,但是同一批樣品
生物菌種實(shí)驗(yàn)問題分析方案2018/03/19
生物菌種實(shí)驗(yàn)問題分析方案:*、陰性樣本的吸光度值低于陽性吸光度值原因:ELISA試劑盒可能原因是出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象或酶標(biāo)板孔中的試劑未充分的混合。解決的辦法是注意操作的方法,注意洗滌時(shí)的方法、加完試劑后可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30s,混勻液體。第二、吸光度值偏高是怎么回事;可能引起的原因有孵育的溫度過高、反應(yīng)的時(shí)間過長(zhǎng)。相對(duì)應(yīng)的解決辦法是調(diào)整孵育環(huán)境的溫度,如無法調(diào)整室內(nèi)的溫度,請(qǐng)將顯色時(shí)間適當(dāng)?shù)目s短、控制反應(yīng)時(shí)間。第三、樣品的稀釋:樣品稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,
海洋微生物菌種說明書檢測(cè)步驟2018/03/16
海洋微生物菌種檢測(cè)步驟ELISA用血清來檢測(cè),首先血液要經(jīng)過至少半個(gè)小時(shí)的凝集,然后取血清。將酶復(fù)合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對(duì)照,還有就是質(zhì)控品(這是嚴(yán)格的要求,它的范圍必須在質(zhì)控范圍內(nèi))。經(jīng)過一個(gè)小時(shí)的孵育,然后洗板,加底物,半個(gè)小時(shí)避光反應(yīng)后加終止液即完成反應(yīng)部分,然后就是讀數(shù)。由數(shù)值來判斷結(jié)果的陰性或陽性。檢測(cè)方法雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法,操作步驟如下:雙抗體夾心法一、將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。二、加受檢標(biāo)本
林業(yè)菌種實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的操作2018/03/12
林業(yè)菌種實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的操作:①將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品,制成混合標(biāo)樣,并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣。混合標(biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。②注入色譜柱,以(標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積)為響應(yīng)值。③根據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系,即W=f×A,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。④將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品,注入色譜柱,得到欲測(cè)組分的響應(yīng)值。⑤根據(jù)已知的系數(shù)f,即可求出欲測(cè)組分的濃度。實(shí)驗(yàn)加樣須注意如下問題:1、吸取樣品時(shí),加樣槍吸頭不應(yīng)黏附多余的液體,加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體,這樣會(huì)導(dǎo)致液體殘留
生物菌種具體操作步驟如下2018/03/09
生物菌種具體操作步驟如下:1)抗原固相化:將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原,洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。2)加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本,再加入抗體,保溫反應(yīng)。樣本中藥物與固相抗原同時(shí)競(jìng)爭(zhēng)與特異性抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去游離物質(zhì)及吸附在固相載體上結(jié)合不緊密的物質(zhì)。3)大鼠elisa試劑盒加酶標(biāo)抗抗體,固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合,從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與樣本中受檢藥物的量負(fù)相關(guān)。4)加底物顯色,固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過儀器檢測(cè)分析,測(cè)知
海洋微生物菌種實(shí)驗(yàn)的常見問題及解決方法2018/03/07
海洋微生物菌種實(shí)驗(yàn)的常見問題及解決方法一、選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。二、加樣可能原因:1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決方法:1)標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間
海洋微生物菌種技術(shù)采用特點(diǎn)2018/03/05
海洋微生物菌種檢測(cè)抗原抗體1.檢查抗原和半抗原方面。尚有用于檢查大腸桿菌、銅綠假單胞菌、破傷風(fēng)梭菌毒素、輪狀病毒、呼吸道融合及巨細(xì)胞病毒等。在免疫化學(xué)方面可用于檢測(cè)瘋牛病、癢病等病原學(xué)檢測(cè)。2.檢查抗體方面。用ELISA間接法檢查抗體,已獲得對(duì)多種傳染病和寄生蟲病的血清學(xué)診斷,亦開始廣泛用于現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查。在寄生蟲病方面,它用于對(duì)阿米巴、血吸蟲、肺吸蟲、肝吸蟲、旋毛蟲病等血清學(xué)診斷。在病原微生物方面已用于檢查鏈球菌、沙門菌、布氏桿菌、結(jié)核桿菌、流感病毒、輪狀病毒、皰疹病毒、狂犬病毒等,其敏感性
林業(yè)菌種檢測(cè)未知抗體的間接法2018/03/02
林業(yè)菌種檢測(cè)未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;4.(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’zui后一遍用DDW洗滌。7.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。8.終止反應(yīng):于各反應(yīng)
生物菌種標(biāo)本處理注意事項(xiàng)2018/02/28
生物菌種標(biāo)本處理注意事項(xiàng):(1).均質(zhì):①組織樣本:肉、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)反復(fù)絞碎,混合均勻。②水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),用均質(zhì)器均漿;原料表面較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。③蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充分混勻。④水果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除去表面的水分,取食用部分。(2).振蕩提取:將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中,振蕩,使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部,提取待測(cè)組分。①振蕩方式:振蕩器上進(jìn)行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。②在組織樣本中
海洋微生物菌種本信息簡(jiǎn)介2018/02/26
海洋微生物菌種本信息簡(jiǎn)介ACE是一種膜結(jié)合糖蛋白分子量為150000含鋅屬二肽羧肽酶能使血管緊張素I(十肽由腎素轉(zhuǎn)化而來)肽鏈C末端的*和*殘基水解形成具有增壓作用的血管緊張素II(八肽)后者通過與血管氣管平滑肌作用引起血管支氣管收縮ACE也具有降血壓作用并參與緩激肽P物質(zhì)等多肽性炎性物質(zhì)的滅活A(yù)CE還能直接作用于腎上腺皮質(zhì)促進(jìn)醛固酮分泌因此ACE是腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)以及緩激肽系統(tǒng)的重要調(diào)節(jié)因素影響人體多種生理機(jī)能ACE分布于全身各組織以肺副睪zui高其次為十二指腸胰卵巢主動(dòng)脈甲狀腺脾腎與
生物菌種應(yīng)注意的實(shí)驗(yàn)規(guī)則:2018/02/23
生物菌種應(yīng)注意的實(shí)驗(yàn)規(guī)則:A、酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。B、實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。C、終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來水沖洗。D、濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶,使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以*溶解。E、洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。F、用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。G、試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。H、不同批號(hào)試劑組分不得
生物菌種實(shí)驗(yàn)的這些要求需知2018/02/10
生物菌種實(shí)驗(yàn)的這些要求需知:1.在試用期,應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。2.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,應(yīng)于37℃孵育15分鐘。3.此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。每個(gè)試劑盒說明書中都是有其注意事項(xiàng)的,這里就不一一例舉,如果想了解的話也可以來電我公司詢問,我們將產(chǎn)品說明書發(fā)送給您。下面就是一些實(shí)驗(yàn)技術(shù)的相關(guān)須知:1.準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等;2.根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量;3.按說明書將所用試劑平衡至室溫
海洋微生物菌種組成結(jié)構(gòu)編輯2018/02/09
海洋微生物菌種組成結(jié)構(gòu)編輯:1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒
海洋微生物菌種實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析2018/02/07
海洋微生物菌種實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析:一、孵育完畢后取出微孔板,如果采用水浴法,用吸水紙吸干外壁的水分。二、在微孔后面放置一張白紙并觀察孔內(nèi)的顏色變化,從微孔壁側(cè)面所能觀察的顏色比從頂部或者底部所能觀察到的更準(zhǔn)確。三、有時(shí)候孵育時(shí)在微孔側(cè)旁會(huì)出現(xiàn)氣泡,可以在沒有氣泡的另一側(cè)進(jìn)行觀察,對(duì)于一些顏色介于陰性和陽性質(zhì)控的樣品,需要進(jìn)行更進(jìn)一步的分析和重測(cè)。四、試劑的準(zhǔn)備孔板(條或孔)和陽性和陰性質(zhì)控臨用前取出,應(yīng)在室溫下放置至少半小時(shí),不使用的微孔板應(yīng)置于2-8°C保存,剩余的陽性和陰性質(zhì)控應(yīng)放回原處冰凍保存。
林業(yè)菌種實(shí)驗(yàn)安全性2018/02/05
林業(yè)菌種實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。3、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。4、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。5、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。實(shí)驗(yàn)
生物菌種實(shí)驗(yàn)外周血樣本2018/01/31
生物菌種實(shí)驗(yàn)外周血樣本一般挑選左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合懇求,以其他手指部位替代。對(duì)燒傷患者,可挑選皮膚完優(yōu)點(diǎn)采血。由于有些血液慣例檢查(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類等)受生理要素影響不堅(jiān)定過大,比照時(shí)宜使條件盡量共同。觸及到體內(nèi)出、凝血功用的檢查項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢查,必定要注意了解患者是不是用過抗凝、促凝藥物,以便在削減或避免煩擾要素的影響。實(shí)驗(yàn)?zāi)蛞簶颖就獦?biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等要素的影響也較大,格外是飲食的影響,故
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