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海洋微生物菌種標本的采納和保留2018/06/25

海洋微生物菌種標本的采納和保留可用作豚鼠elisa試劑盒測定的標本非常廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如大便和某些分泌物)。大多數豚鼠ELISA試劑盒檢查均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，別的成份均平等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清自然凝結、收縮后即可獲得。除特殊情況外，在醫學查驗中均以血清作為檢查標本。在豚鼠ELISA試劑盒

海洋微生物菌種處理植物樣本步驟2018/06/22

海洋微生物菌種處理植物樣本步驟1.稱取的組織重量不能低于50mg。2.勻漿的比例按照10%，即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液一般選取PBS(PH=7.2-7.4)3.組織在勻漿器勻漿過程中，勻漿液應該分2次加進去，這樣勻漿更充分。4.充分勻漿完成后離心取上清，離心機的轉數選取2000-3000轉每分，轉數不宜超過5000.離心時間為15-30分鐘。心法應該如何操作檢測方法詳細解析1.雙抗體夾心法測抗原針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體。適用于測定二價或二價以

林業菌種提示您血清操作誤區2018/06/15

林業菌種實驗內標法的操作：①將已知量的內標樣加入標準樣品，制成混合標樣，并配制一系列的已知濃度的工作標樣?；旌蠘藰又袠藰优c內標樣的摩爾比不變。②注入色譜柱，以（標樣峰面積/內標樣峰面積）為響應值。③根據響應值與工作標樣濃度之間存在的線性關系，即W=f×A，制成標準曲線。④將已知量的內標樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應值。⑤根據已知的系數f，即可求出欲測組分的濃度。提示您血清操作誤區：1、解凍血清不隨時搖晃均勻，使溫度及成分均一。2、在沒有特別的要求下，還堅持要做熱滅活。3、直接由-

生物菌種樣本加樣的經驗分享2018/06/11

生物菌種樣本加樣的經驗分享1.細胞上清：前處理必須是細胞離心去除，每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時，用標準品稀釋液直接稀釋。2.腦脊液：前處理必須是細胞離心去除，每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時，用標準品稀釋液直接稀釋。3.血清血漿：請加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大，請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。A血清標本應是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；B血漿標本，推薦用EDTA的方法收集若待測樣本不能

海洋微生物菌種實驗的技術手段和實驗前準備2018/06/08

海洋微生物菌種實驗的技術手段和實驗前準備1、其抗原抗體反應具有高度的特異性。2、將酶催化反應的放大作用和抗原抗體親和反應的高度專一性、特異性相結合，以酶標記的抗原或抗體作為主要試劑進行免疫測試，所以具有很高的靈敏度。3、實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。實驗可以說是免疫學反應應用到科研出產中*為廣泛*為敏捷的技術手段，那么它的實驗前有什么需要準備的？按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，

林業菌種實驗準備的過程2018/06/06

林業菌種實驗準備的過程1、酶標儀：經常維護其光學部分，防止濾光片霉變，ELISA試劑盒定期檢測校正，使其保持良好的工作性能。2、洗板機：每個廠家設置洗板后的殘留液有各自的規定一般不超過2ul，人工扣板時，墊紙不濕，定期檢查管孔是否堵塞。3、一般酶標儀無585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片，450nm濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長為630nm）。使用酶標儀后操作規范：1、使用移液器加液，移液槍頭不能混用。2、洗板要干凈，避免交叉污染。3、嚴格按照試劑盒的說明書操作，反應時間準

生物菌種樣本的處理方式2018/06/04

生物菌種樣本的處理方式:1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現采現用，胃液、唾液的采集時間是空腹采集，一般隔夜尿不采集；2、采集血清時，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時后，800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存備用；3、組織提取液、肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存備用；4、采集血漿時一般不加抗凝劑，采集后立即離心800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存備用；5、不貼

海洋微生物菌種樣本的采納和保存辦法小結：2018/05/30

海洋微生物菌種樣本的采納和保存辦法小結：的試劑，良好的儀器和的操作是保證ELISA試劑盒檢測成果正確牢靠的必要條件。血清標本宜在新鮮時檢測。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同即是血清。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會發作假陽性反應。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝結、縮短后即可獲得。大部分ELISA檢測均以血清為標本。在ELISA中血漿和血清可對等使用。凍住血清融解后

林業菌種檢驗中的作用2018/05/28

林業菌種檢驗中的作用在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象，此時反應后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結果將低于實際的含量，這種現象被稱為鉤狀效應（hookeffect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中H

林業菌種實驗步驟及注意事項的資料2018/05/25

林業菌種實驗步驟及注意事項的資料1.把聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質電泳轉移到硝酸纖維膜上。1)轉移緩沖液洗滌凝膠和硝酸纖維素膜，將硝酸纖維素膜鋪在凝膠上，用5ml移液管在凝膠上來回滾動去除所有的氣泡。2)在凝膠/濾膜外再包一張3mm濾紙(預先用轉移緩沖液浸濕)，將凝膠夾在中間，保持濕潤和沒有氣泡。3)將此濾紙/凝膠/薄膜濾紙按照廠家建議方法放入電泳裝置中，凝膠面向陰極。4)將上述裝置放入緩沖液槽中，并灌滿轉移緩沖液以淹沒凝膠。5)按照廠家所示接通電源開始電泳轉移。6)轉移結束后，取出薄膜和凝膠，棄去

生物菌種實驗前務必注意2018/05/23

生物菌種實驗前務必注意1）仔細閱讀說明書2）檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期，請勿使用。3）按說明書確定所有試劑齊全（數量、體積）4）標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內無法實驗者，注意低溫保存5）準備好所有實驗額外所需物品，（比如移液器，試管，清洗器，酶標儀）6）按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據檢測標本數量確定所需試劑的量7）檢查試劑盒內每種試劑的貯存條件，保證所有試劑均按照試劑盒內說明書推薦的條件存儲。8）檢查不穩定或者變質的試劑

海洋微生物菌種基本原理是2018/05/21

海洋微生物菌種基本原理是:①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。樣本處理及要求:1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-300

林業菌種通用操作方法2018/05/16

林業菌種通用操作方法1.加規范品：在酶標包被板上設規范品孔，elisa試劑盒ELISA試劑盒依次參加不同濃度的規范品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)人ELISA試劑盒。2.加樣：別離設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其他各步操作一樣)、待測樣品孔。大鼠ELISA試劑盒在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl，然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，elisa試劑盒悄悄晃動混勻人ELISA試劑盒。3.顯色：每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μ

生物菌種檢測樣本中體液的處理方式2018/05/14

生物菌種檢測樣本中體液的處理方式1、采集血漿時一般不加抗凝劑（主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽），采集后立即離心800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存備用；1.1、血液包括血漿和血清，它們的主要區別就是：血清凝血而血漿不凝血，所以它們的處理方式也就不一樣1.2、如要采集血清，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時后，800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存備用；2、胃液和唾液的采集方式一般現采現用，但是一般飯后半小時內不易采集，因為剛

海洋微生物菌種實驗技術要點2018/05/09

海洋微生物菌種實驗技術要點1.在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。2.小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本/標準品，酶結合物或底物時，個孔與*后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且，洗滌不充分將影響試驗結果。3.試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標簽上的標示為準

林業菌種實驗中背景因素的影響2018/05/02

林業菌種實驗中背景因素的影響一、洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊，其實很重要，因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合反應。如果背景過高，而您懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數。二、封閉更關鍵封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也希望抗體只與目的蛋白結合吧。如果您的背景過高，懷疑封閉不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或

生物菌種檢測夾心法2018/04/23

生物菌種檢測夾心法一、原理采用兩株識別不同表位的抗IL-8單克隆抗體，其中一株(4D7)作為包被抗體，以識別和結合待檢標本中的Il-8,另一株作為酶標抗體，與結合于包被抗體的IL-8的另一個表位結合并催化底物顯色。二、試劑器材1.試劑盒提供包被抗體、酶標抗體、標準品，底物(ABTS)、96孔elisa板。2.包被緩沖液、PBS、底物緩沖液配制同常規ELISA法。三、操作步驟：1.包被：pH9.5碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板,100μl/孔，放4℃,36小

海洋微生物菌種技術中標本制作2018/04/18

海洋微生物菌種技術中標本制作1、不需要使用雙氧水處理，封閉和一抗孵育與其相同。2、的二抗使用不同熒光標記的二抗孵育，孵育時間根據抗體的工作濃度確定。3、二抗孵育之后充分洗片后即可貼片、封片和觀察。4、免疫熒光在封片時常使用封片劑或甘油：0.01MPBS（1：1）。條件許可，建議購買抗淬滅的封片液，使標本可以保存更久。5、的孵育以及后續處理需要避光。6、染色假陽性可能會多，需要分別設定陽性和陰性對照。注意事項1、染色后一般在1h內完成觀察，或于4℃保存4h，時間過長，可能會使熒光提前衰退。2、每次

林業菌種實驗中加樣所遇到的問題解析2018/04/16

林業菌種實驗中加樣所遇到的問題解析測定現通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式，測定操作非常簡單，一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結果判斷和結果報告及解釋等方面，其中任一步驟的不當都會影響測定結果，且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。正確的加樣方法應為45度，吸頭貼著孔壁加入，應注意角度太小，會使液體殘留在孔壁上，導致加樣不準確；吸頭應當貼著管壁和液面的交界處！目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細

生物菌種實驗操作時的注意事項2018/04/09

生物菌種實驗操作時的注意事項1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui