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細胞培養(yǎng)的用途有哪些2015/07/02
細胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下,使其生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養(yǎng)技術。細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個細胞,也可以是細胞群。細胞培養(yǎng)目的與用途:藥物研究與開發(fā)(1)新藥篩選:如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。(2)疫苗研究與開發(fā):如病毒性疫苗的研究與開發(fā)(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。(3)基因工程藥物研究與開發(fā):如干擾素研究與開發(fā),細胞生長因子研究與開發(fā)等。(4)細胞工程藥物研究與開發(fā):生物活性多肽研究與開發(fā),人參皂甙、*等生物活
ELISA試劑盒分析生物的結構與功能2015/06/29
生物大分子的多種多樣功能與它們特定的結構有密切關系。蛋白質的主要功能有催化、運輸和貯存、機械支持、運動、免疫防護、接受和傳遞信息、調節(jié)代謝和基因表達等。由于結構分析技術的進展,使人們能在分子水平上深入研究它們的各種功能。ELISA試劑盒酶的催化原理的研究是這方面突出的例子。蛋白質分子的結構分4個層次,其中二級和三級結構間還可有超二級結構,三、四級結構之間可有結構域。結構域是個較緊密的具有特殊功能的區(qū)域,連結各結構域之間的肽鏈有一定的活動余地,允許各結構域之間有某種程度的相對運動。蛋白質的側鏈更是
大腸桿菌電轉化感受態(tài)細胞制備流程及轉化方法2015/06/25
*天:1.將適合菌株(如XL1-Blue,DH5α)置于LB或其他營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上,在37°C下隔夜培養(yǎng);2.高溫滅菌大的離心瓶(250-500ml)以備第二天搖瓶用;3.準備幾瓶滅菌水(總量約1.5升),保存于冷凍室中以備第二天重懸浮細胞用;第二天:4.轉移0.2-1ml隔夜培養(yǎng)物至裝有500mlLB(或其他營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基)的1-2升搖瓶;5.37°C下劇烈振蕩培養(yǎng)2-6小時;6.定時監(jiān)控OD600值(培養(yǎng)1小時后每半小時測定一次;7.當OD600值達到0.5-1.0時,從搖床中取出搖瓶,
ELISA的基本原理、應用及方法和類型2015/06/18
ELISA的基本原理有三條:(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;(3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的
胎牛血清的種類2015/06/15
現(xiàn)在市面上胎牛血清的種類很多,有國內(nèi)的,也有國外的,不過由于現(xiàn)在國外的產(chǎn)品禁止進口所以很多一些產(chǎn)品都是仿貨,下面是江蘇科特商貿(mào)對胎牛血清做詳細的介紹:一、特級類胎牛血清(zui別的,于干細胞的胎牛血清)1、Hyclone北美特級胎牛血清目前,性能的血清,實驗室反饋不錯的,那就是Hyclone的特級胎牛血清,Hyclone的“頭牌”。這款血清--Hyclone特級胎牛血清(DefinedFBS),是世界上*經(jīng)過40納米過濾的*胎牛血清,的促細胞生長作用及產(chǎn)品穩(wěn)定性。內(nèi)毒素含量小于10EU/ml,血
瓊脂和瓊脂糖簡介及用途2015/06/11
瓊脂和瓊脂糖產(chǎn)品用途簡介瓊脂(Agar),又名瓊膠、菜燕、凍粉,是一類從石花菜及其它紅藻類(Rhodophyceae)植物提取出來的藻膠(phycocottoid),在我國及日本已有三百多年(1658年)的歷史。瓊脂糖Agarose,縮寫為AG,是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份,也譯為瓊膠素或瓊膠糖。一、性狀條狀瓊脂為類白色或淡黃色半透明細長條狀;粉狀瓊脂為白色或淡黃色粉末。瓊脂糖一般為白色粉末。在沸水中極易分解成溶膠;在冷水中不溶,但能吸水膨脹成膠塊狀,溶膠液呈現(xiàn)中性反應。二、用途:瓊脂、瓊脂糖
生物實驗中血清學試驗的一般特點2015/06/08
血清學反應(serologicreactions)是指相應的抗原和抗體在體外進行的結合反應。由于抗體主要存在于血清中,進行這類反應時一般都要用含有抗體的血清作為實驗材料,所以把體外的抗原、抗體反應稱為血清學反應。這類反應是根據(jù)抗原、抗體具有高度特異性的原理來進行實驗的,即用已知的一方來檢測另一方的存在。既可定性,又可定量。可用已知抗體來檢測未知抗原,如鑒定病原微生物;也可用已知抗原來檢測未知抗體,如協(xié)助診斷某種疾病。血清學反應的一般特點:1.抗原抗體的結合具有特異性,當有共同抗原體存在時,會出現(xiàn)
內(nèi)切酶的特性、酶解與瓊脂糖凝膠電泳2015/06/04
限制性核酸內(nèi)切酶:是一類能識別雙鏈DNA分子特異性核酸序列的DNA水解酶。是體外剪切基因片段的重要工具,所以常常與核酸聚合酶、連接酶以及末端修飾酶等一起稱為工具酶。瓊脂糖凝膠電泳:是利用瓊脂糖溶化再凝固后能形成帶有一定孔隙的固體基質的特性,其密度取決于瓊脂糖的濃度。在電場的作用下及中性pH的緩沖條件下帶負電的核酸分子就可以向陽極遷移。瓊脂糖凝的濃度影響給定大小的線狀DNA的遷移率,因此采用不同濃度的凝膠可以分離不同大小范圍的DNA*段。EB:即3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲錠溴鹽,(Eth
抗體的保存2015/06/01
抗體(英語:antibody),(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由B淋巴細胞分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質,僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個*特征,該外來目標被稱為抗原。抗體是具有4條多肽鏈的對稱結構,其中2條較長、相對分子量較大的相同的重鏈(H鏈);2條較短、相對分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結形成一個由4條多肽鏈構成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,重鏈有μ、δ、γ、ε和α五
細胞支原體污染的一般情況及預防措施2015/05/28
細胞株若受到細菌、真菌、支原體、或是特定病毒等之污染時,會嚴重的影響實驗的結果。而細菌、真菌等之微生物污染時,較易自培養(yǎng)基等的外觀變化察覺。但是若受到支原體之污染時,細胞之外觀較無明顯變化,但是其污染會造成細胞之生長速率緩慢、細胞產(chǎn)生病變之型態(tài)改變等等變化。一、造成支原體高污染率的原因為:1、支原體size0.1~0.8um,無細胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45um)2、支原體污染時,沒有明顯的肉眼或一般光學顯微鏡可觀察到的特征變化3、過去缺乏簡單、快速且可靠的檢測方式4、細胞流通間缺
科特商貿(mào)Elisa試劑盒競爭法測抗原的原理與步驟2015/05/25
Elisa試劑盒競爭法測抗原的原理當抗原材料中的干擾物質不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。標本中抗體量越多,結合在固相上的酶標抗體愈少,因此陽性反應呈色淺于陰性反應。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有干擾物質,直接包被不易成功,可采用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應的抗體,然后加入抗原,形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質,然后再加標本和酶標抗體進行競爭結合反應。競爭法測抗體有多種模式,可將標本和酶
江蘇科特商貿(mào)---各類組織的取材技術2015/05/21
(一)皮膚和粘膜的取材皮膚和粘膜是上皮細胞培養(yǎng)的重要組織來源,主要取自于手術過程中的皮片,方法似外科取斷層皮片手術操作,但面積一般2~4cm2即可,這樣局部*痕,若對燒傷皮膚進行上皮細胞膜片移植,可從大腿或臀部取較大皮片,可取2~4cm2皮片,但取材時不要用碘酒消毒;若培養(yǎng)上皮細胞,取材時不要切取太厚,盡可能去除所攜帶的皮下或粘膜下組織;若欲培養(yǎng)成纖維細胞,則反之。皮膚粘膜與外界相通部位,因表面細菌、霉菌很多,取材時應嚴格消毒,必要時要用高濃度抗菌素和適量兩性霉素B漂洗、浸泡。(二)內(nèi)臟和實體瘤
培養(yǎng)基的配制與滅菌技術2015/05/18
培養(yǎng)基是將微生物生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)物質,用人工的方法配制而成的用于培養(yǎng)微生物的營養(yǎng)基質。培養(yǎng)基種類很多,不同的微生物所需培養(yǎng)基不同。就培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的來源可分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基特殊用途可分加富培養(yǎng)基,選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基制成后的物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入1.5%-2.0%瓊脂作凝固劑;半固體培養(yǎng)基則加入0.5%-0.8%的瓊脂。一般培養(yǎng)基除含有大量水分外,還含有碳素、氮素、無機鹽類和維生素等
江蘇科特商貿(mào)ELISA實驗中樣本的收集和運輸2015/05/14
ELISA的樣本收集與運輸:利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。ELISA實驗中的血清需采用血管收集血液,室溫血液自然凝固30分鐘,1000xg離心15分鐘左右,收集上清,分裝后,標好號,-20°C或-80°C保存。運輸是用干冰。(注:一個樣本檢測一個指標至少需要40ul血清,您是一個樣本檢測4個指標,至少需要160ul血清,多準備一些。)光鏡:肝臟組織4%多聚甲醛
免疫檢測的基礎知識介紹2015/05/11
ELISA是一種免疫測定。免疫測定(immunoassay,IA)是應用免疫學技術測定標本的方法。在臨床檢驗中主要通過抗原抗體反應檢測體液中的抗體或抗原性物質。1、抗原抗原是能在機體中引起特異性免疫應答的物質。抗原進入機體后,可刺激機體產(chǎn)生抗體和引起細胞免疫。在免疫測定中,抗原是指能與抗體結合的物質。能在機體中引起抗體產(chǎn)生的抗原多為分子量大于5000的蛋白質。小分子化合物在與大分子蛋白質結合后能引起機體產(chǎn)生特異性抗體的,稱為半抗原(hapten)。例如某些激素、藥物等。抗原的反應性取決于抗原決定
江蘇科特商貿(mào)細胞膜的通透性觀察2015/05/07
一、實驗目的1.了解細胞膜對物質通透性的一般規(guī)律。2.了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機制。二、實驗原理細胞膜是細胞與環(huán)境進行物質交換的選擇通透性屏障。它是一種半透膜,可選擇性控制物質進出細胞。各種物質出入細胞的方式是不同的,水是生物界zui普遍的溶劑,水分子可以按照物質濃度梯度從滲透壓低的一側通過細胞膜向滲透壓高的一側擴散,這種現(xiàn)象就是滲透。滲透作用是細胞膜的主要功能之一。將紅細胞放在低滲鹽溶液中,水分子大量滲到細胞內(nèi),可使細胞脹破,血紅蛋白釋放到介質中,由不透明的紅細胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液,這
重組純化蛋白A、G的主要應用2015/05/04
重組純化蛋白A(RecombProteinA),蛋白A是從A類Streptococci細菌中分離出來的胞壁蛋白,與多數(shù)哺乳動物的IgGFc段結合(包括:人、山羊、綿羊、兔、豚鼠、馬、豬、猴、小鼠等)。不與狗IgG結合、不結合人IgM、IgD、和IgA。重組蛋白G(RecombProteinG)已經(jīng)除去了與白蛋白及細胞表面結合位點,減少了交叉反應和非特異性結合。因此,它比天然蛋白G和蛋白A有更大的親和力。可以代替二抗,廣泛應用于免疫化學等領域。在親和力、穩(wěn)定性等方面好。蛋白A是從非致病性Bacil
免疫酶技術2015/04/30
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯(lián)結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。目前應用zui多的是酶聯(lián)免疫吸附實驗(elisa),它是使抗原或抗體吸附于固相載體,使隨后進行的抗原抗體反應均在載體表面進行,從而簡化了分離步驟,提高了靈敏度,即可檢測抗原,也可檢測抗體。實驗方法包括間接法、夾心法及競爭法。為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相
科研實驗中血標本提取RNA的方法2015/04/30
在用血液標本進行基因表達研究時,需要及時把新鮮血液中有核細胞的RNA提取出來。全血還不能直接放到-80℃保存,即使在-80℃保存,全血中的RNA也容易發(fā)生降解。傳統(tǒng)的提取新鮮全血RNA方法是把先把有核細胞從全血中分離出來,需要加白細胞分離液、離心等步驟,比較繁瑣,在臨床醫(yī)院往往難以實施,的RNA提取方法為RN01TRIpureLS裂解全血提取RNA。(一)淋巴細胞分離液分離單個核細胞:外周血及骨髓(抗凝)利用淋巴細胞分離液分離單個核細胞(1)外周血送檢需5-10ml抗凝血,骨髓需1-3ml抗凝,
江蘇科特商貿(mào)為您詳細介紹細菌培養(yǎng)基的分類2015/04/27
培養(yǎng)基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。細菌培養(yǎng)基的分類如下:1.牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏0.3g,蛋白胨1.0g,氯*鈉0.5g,瓊脂1.5g,水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯*鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號后,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂*溶解后補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到
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