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ELISA試劑盒實驗不可忽視的小細節2015/09/21

ELISA試劑盒可用于測定抗原，也可用于測定抗體。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。主要有：直接法、雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法、應用親和素和*系統（ABS）等。ELISA試劑盒必須遵守以下3個核心原理：（1）抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并保持其免疫學活性；（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；（3）酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反

血清使用和處理中的常見問題2015/09/17

1.保存血清的方法建議血清應保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會使產品品質受損將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。3.血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理血清中沉淀物的出現有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍后，也會存在于血清中，亦

病原生物學ELISA試劑盒免疫學實驗詳解2015/09/10

病原生物學ELISA試劑盒免疫學實驗詳解（1）皮膚破傷：先除盡異物，用無菌生理鹽水洗凈后，涂以2%紅汞或2%碘酒，必要時進行包扎。（2）灼傷：涂以凡士林油，5%鞣酸或2%苦味酸。（3）化學藥品腐蝕傷：若為強酸，先用大量清水沖洗，再以5%*或氫氧化銨溶液洗滌中和之；強堿腐蝕傷，則先以大量清水沖洗后，再用5%醋酸或5%硼酸溶液洗滌中和之。若受傷部位是眼部，經過上述步驟處理后，zui后滴入橄欖油或液體石臘1、2滴，滋潤之。（4）吸入病菌菌液：應立即吐入盛有消毒液的容器內消毒，并用1：1000*漱口；根

ELISA試劑盒方法與硝酸纖維素膜微粒介紹2015/09/07

實驗方法1.1混合抗原直接測試按豚鼠膜迷路蛋白抗原性分析文章講述的方法，將1.2ml大鼠原血清加入7.0ml10％丙烯酰胺溶液，聚合后在10°C、200mA、2h條件下大鼠血清蛋白電泳吸附于NC膜，用蒸餾水漂洗后，切一10×100mm小條裝入10ml試管備用。對照組將同樣面積空白NC膜用蒸餾水漂洗后備用。ELISA試劑盒在上述裝有NC膜的試管中加入10mlDMSO，充分搖勻，室溫1h；加入等體積0．1mol／LpH9．0*溶液，充分混勻。3000r／min離心3～5min，收集沉淀，即為含大鼠血

豬ELISA試劑盒實驗的準確度2015/08/31

豬ELISA試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點，蔗糖封閉的原理：1、豬ELISA試劑盒實驗中，蔗糖本身沒有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護劑"的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加，當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可)，0.4%的明膠，但是實驗表明前者

培養基中丙酮酸鈉的作用是什么？2015/08/27

丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。Hank's*（HBS）要在空氣中使用，不需要CO2培養箱。原因是什么？Hank's*（HBS）和Earle's*（EBS）有什么本質的功能差別？HBS和EBS的主要差別在于*的水平,在Eagles（2.2g/L）中比在Hanks（0.35g/L）中高。*需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2中，溶液會變堿，Hanks液在CO2培養箱中會

江蘇科特商貿基本培養基的分類2015/08/24

江蘇科特商貿有限公司是一家集研發、銷售為一體的生物科技公司，公司秉承誠信、品質、服務的經營理念，對客戶誠信負責，對工作精益求精，堅持、學習、務實、創新的企業精神，倡導忠誠、勤奮、創作、能力的人才理念，吸納和培養了大批的高科技人才，建立了一支高素質的員工隊伍。公司以“致力生命科技，提升產品質量"為經營使命，為客戶提供實驗設計及相關試劑選配等技術服務，力求為客戶提供的服務。放眼未來，酶聯生物將繼續專注于質控領域產品的開發，致力于成為的科研試劑供應商！基本培養基是僅能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養

冷凍細胞活化的方法2015/08/20

1、冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。2、細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常（例如產生單株抗體或是其它蛋白質）。3、材料：37℃恒溫水槽、新鮮培養基、無菌吸管/離心管/培養瓶、液氮或干冰容器。4、步驟：（1）操作人員應戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。（2）自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。（3）將新鮮培養基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70%酒精并擦拭

生物實驗中細胞融合前準備2015/08/17

一、骨髓瘤細胞系的選擇骨髓瘤細胞應和免疫動物屬于同一品系，這樣雜交融合率高，也便于接種雜交瘤在同一品系小鼠腹腔內產生大量McAb。用于融合試驗的主要骨髓瘤細胞系有P3/X63-Ag8（X63）、P3/X63-Ag8.653（X63-Ag8.653）、P3/NSI-1-Ag4-1（NS-1）、P3/X63-Ag8.Ul（P3Ul）、SP2/0-Ag14（SP2/0）、F0、S194/5.XXO.BU.1、MPC11-45.6TG1.7、210.RCY3.Ag1.2.3、GM15006TG-A12及

細胞的復蘇實驗2015/08/13

一.實驗前準備：1.將水浴鍋預熱至37℃2.用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。二．取出凍存管：1.根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。2.從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。三．迅速解凍：1.迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化。2.約1-2min后凍存管內液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內。四.平衡離心：用架盤天平

基礎培養基的詳細介紹2015/08/10

絕大多數培養基是建立在*（BSS）基礎上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。zui廣泛應用的培養基是Eearle`sMEM的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規含有無機鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12這兩種培養基各取1/2，形成神經生物學zui通用的培養基。Dulbecco`s改良培養基――DMEM，現應用于快速生長的細胞，同MEM含有相同的營養成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養基，應

細胞凋亡實驗的實驗原理及方法步驟2015/08/06

一、實驗原理細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的組合，是細胞遵循一定規律自己結束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可鑒別的形態學和生物化學特征。在形態上可見凋亡細胞與周圍細胞脫離接觸，細胞變園，細胞膜向內皺縮、胞漿濃縮、內質網擴張、細胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內質網和細胞膜進一步融合將細胞分成多個完整包裹的凋亡小體，凋亡小體zui后被吞噬細胞吞噬消化。在凋亡

胎牛血清的主要成分2015/08/03

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質zui高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分zui少

染色體結構顯示與檢測2015/07/27

1）染色體顯帶顯Q帶法1.漂洗：取經過干熱預處理或已老化的染色體標本，置于pH6.0緩沖液中浸5~10分鐘。2.染色：浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分鐘。3.漂洗：浸入新鮮pH6.0緩沖液中漂洗兩次，每次5分鐘。4.觀察：向標本染色體面滴1~2滴新鮮緩沖液，覆以蓋片（避免出氣泡），置熒光顯微鏡下觀察。顯G帶法*-Giemsa混合顯帶法1．預處理：取中期染色體標本，置60℃～60℃溫箱中20～30分鐘，或在37℃溫箱隔夜，然后浸入0.025M磷酸緩沖液中，pH6.8，56℃溫浴10分鐘。

細胞培養的污染類型2015/07/23

污染是細胞培養的大敵。預防和避免污染是細胞培養成功的關鍵之一。一開始就要十分重視，應積極采取措施，防止污染，否則會前功盡棄，不僅浪費時間，而且浪費人力、物力，甚至造成無法彌補的損失。污染的類型：細胞培養過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質，包括生物和化學物質。一、細菌污染細菌污染是實驗室細胞培養中常見的污染，即使在細胞培養液中加入了抗菌素（一般為預防劑量），也可能因為操作不慎而引起污染。zui常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、

免疫熒光技術之染色方法2015/07/20

一、制片選無自發性熒光的石英玻片或普通玻片，洗凈后浸泡于無水乙醇等量混合液中。用時取出用綢布擦凈。將待檢樣品如組織塊剪成適當大小印壓于玻片上。也可采用冰凍切片或石蠟切片樣品。二、固定除研究細胞表面抗原或不穩定抗原可不固定外，一般均應固定。固定的作用有三：1.防止標本從玻片上脫落。2.除去防礙抗原-抗體結合的類脂，使抗原抗體結合物易于獲得良好的染色結果。3.固定的標本易于保存，如組織切片固定后在-20℃下可保存一年而不改變其染色特性。標本的固定原則是：1.不能損傷細胞內的抗原。2.不能凝集蛋白質。

細胞凍存的一般方法2015/07/16

細胞凍存的一般方法開始細胞凍存前，仔細檢查細胞凍存所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：傳代細胞單層、適宜生長液、滅活小牛血清、*溶液、7.5％NaHC03溶液、0.25％*溶液、標簽用具：100ml方瓶（培養細胞用）、克氏瓶、紅翻帽塞、吸管（10ml、lml）、細胞凍存管、二甲基亞砜、CO2孵箱、超掙臺、倒置顯微鏡、2～8℃冰箱、-20℃冰箱、液氮罐。鏡檢細胞，挑選培養3～4天的細胞，生長狀態良好，無污染、異常及可疑病變細胞。配制細胞培養液：根據不同的細胞需用不同的基礎液，培養液配方為（基礎液

無血清培養基的使用方法2015/07/13

目前，血清仍是動物細胞培養中zui基本的的添加物，尤其是在原代培養或者細胞生長狀況不良時，常常會先使用有血清的培養液進行培養，待細胞生長旺盛以后，再換成無血清培養液。細胞轉入無血清培養基培養要有一個適應過程，一般要逐步降低血清濃度，從10%減少到5%，3%，1%，直至無血清培養。在降低過程中要注意觀察細胞形態是否發生變化，是否有部分細胞死亡，存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。在實驗后這些細胞一般不再繼續保留，很少有細胞能夠長期培養于無血清培養基而不發生改變的。細胞轉入無血清培養之前，要

如何預防細胞培養的污染問題2015/07/09

體外培養的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養的始終，才能將發生污染的可能性降到zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手：1、從物品、用品消毒滅菌著手細胞培養所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養箱進行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養箱后，使用可移動的紫

什么是傳代細胞培養？2015/07/06

原代細胞或細胞株或細胞系需在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的原代細胞或細胞株或細胞系或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續，這個過程體外培養稱為傳代細胞培養。一般認為，細胞培養形成單層匯合，細胞密度與生存空間有密切的關系，將培養細胞分散，以1:2或l:3或1:4以上的比率轉移分散進行培養，即為傳代細胞培養。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數／100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可