產(chǎn)品名稱 | 原代小鼠胰島β細(xì)胞 | 英文名稱 | Mouse Pancreatic Islet β Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1277 |
組織來源 | 胰腺組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
小鼠胰島β分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳suan氫鈉、yi蛋白酶原、脂肪酶、淀粉mei等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌生長抑su，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞，即胰島B細(xì)胞，是胰島細(xì)胞的一種，屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種，能分泌胰島素，與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足（胰島素抵抗），會使血糖升高，從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細(xì)胞癌變會生成胰島素瘤，引起惡性血糖降低癥狀。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰島β采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用逐級消化胰島制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰島β經(jīng)Insulin含量檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；Neuro-2a[N2a；Neuro-2a] | 小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞；PT-67 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；2D12-A10-F6-C4 | 豬傳染性腹瀉病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
青鳉肌肉細(xì)胞系；OLM | 腮腺炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
小鼠淋巴白血病細(xì)胞；L1210 | 柏氏巴貝斯蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞株；CHO-X106 | 豬巴貝斯蟲 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；3-2G6 | 羊巴貝斯蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；MT6A10C09 | 莫氏巴貝斯蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人甲狀腺正常細(xì)胞 | 大巴貝蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人胚腎細(xì)胞；293/N27-7 | 傘枝梨頭霉染料法熒光定量PCR試劑盒 |
羅非魚腦細(xì)胞；TiBC | 沙門氏菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠皮膚鱗癌細(xì)胞系；XL50 | 馬流產(chǎn)沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞株；CHO-TIM-4-Fc | 鴨沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
抗魚類神經(jīng)壞死病毒青鳉單倍體胚胎干細(xì)胞；G1 | 原代小鼠胰島β細(xì)胞都柏林沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；10605A | 哈達(dá)爾沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
流感病毒H7亞型(AIV-H7)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 海德堡沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
