產品名稱 | 原代小鼠臍動脈內皮細胞 | 英文名稱 | Mouse Umbilical Artery Endothelial Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X1619 |
組織來源 | 臍帶組織 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息：
培養信息：包被條件PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：內皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%YI蛋白酶小鼠臍動脈內皮細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞簡介：
小鼠臍動脈內皮細胞分離自臍帶組織；它是臍動脈的重要結構組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠臍動脈內皮細胞采用YI蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的小鼠臍動脈內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預冷的PBS中，盡可能的除去結締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養瓶中，倒置于細胞培養箱中，
4) 2h后，培養瓶中注入2 mL內皮培養基，小心將培養瓶正置于培養箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
小鼠上皮細胞 | 小鼠基質細胞 |
小鼠頜下腺上皮細胞 | 對蝦桿狀病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠腎上腺皮質細胞 | 巴氏阿米巴原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠腎上腺髓質細胞 | 新城疫病毒PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠胰腺導管上皮細胞 | 豬鏈球溶血（SLY）毒基因PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠胰腺腺泡上皮細胞 | 禽網狀內皮組織增殖病病毒(REV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
小鼠甲狀旁腺細胞 | 文氏巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
雜交瘤細胞株；6D7 | 箭毒蛙壺探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠成纖維細胞 | 中腸腺壞死桿狀病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠睪丸支持細胞 | 擬桿屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠海綿體平滑肌細胞 | 流感病毒H15亞型PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠卵巢顆粒細胞 | 芽孢桿通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠卵巢間質細胞 | 原代小鼠臍動脈內皮細胞地衣形芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠輸卵管上皮細胞 | 柯薩奇病毒A16型PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 33蠟狀芽孢桿33探針法熒光定量PCR試劑盒 |
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜，以穩定細胞狀態，然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落，再加入培養液終止消化，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當量的凍存液（基礎培養基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養液5ml混勻細胞，然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮培養基繼續培養。
