1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
產品名稱 | 小鼠原代下丘腦神經元細胞專用培養基 | 貨號 | GOY-XP3175 |
規格 | 100mL/500mL | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
產品介紹
由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持小鼠原代下丘腦神經元細胞最佳的生長狀態。
本產品中已包含小鼠原代下丘腦神經元細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代下丘腦神經元細胞的培養。
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法：按照對應保存條件保存12個月，配置好的培養基2℃～8℃,保存2個月；
質量控制
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細胞復蘇?：
從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞換液?：
吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。
加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。
加入新的培養基。
?細胞傳代?：
當細胞長到80%~90%時，進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。
棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。
做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞凍存?：
選擇對數生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。
加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
