產品名稱 | 原代小鼠小梁網細胞 | 英文名稱 | Mouse Trabecular Meshwork Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X1051 |
組織來源 | 眼球 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
小鼠小梁網分離自眼球組織；小梁網由角膜基質纖維、后界膜和角膜內皮向后擴展而成，覆蓋在鞏膜靜脈竇的內側。小梁網細胞在眼內壓調節中起著關鍵作用；小梁網細胞內有特定的神經遞質和神經肽受體，其中包括腎上腺素、乙酰dan堿和神經肽Y。青光眼是由于眼內壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病，小梁網細胞的體外培養是青光眼病因學研究的重要手段之一。在小梁網細胞中，一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發細胞內信號傳導機制，小梁網細胞可合成不同類型的細胞外基質蛋白以及金屬蛋白酶。形態學觀察可見，剛從組織塊長出的原代細胞，形態各異，多數呈星狀或不規則形。細胞有胞突，核橢圓形，胞體肥大，胞漿豐富，且可見吞噬顆粒。隨著細胞的增生及相互融合為單層，細胞的形態趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失，排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規則形。胞體透亮，包膜清晰。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠小梁網采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠小梁網經NSE（神經元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預冷的PBS中，盡可能的除去結締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養瓶中，倒置于細胞培養箱中，
4) 2h后，培養瓶中注入2 mL內皮培養基，小心將培養瓶正置于培養箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
人胚胎，皮膚，肌肉；M-22 | 人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1 |
人臍靜脈細胞融合細胞；EA.hy926 | 色葡萄球菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人胚胎肺成纖維細胞；WI-38 | 霍亂弧菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人胚腎細胞；293 [HEK-293] | 霍亂弧菌O139型核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人淋巴細胞；1301 | 霍亂弧菌O1型核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38] | 銅綠假單胞菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人羊膜細胞；WISH | 阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
兔中耳上皮細胞 | 枯草芽孢桿菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
倍體細胞；HEL | 單核細胞增生李斯特氏菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人正常肝細胞；L-02 | 腸出血性大腸桿菌O157核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人胚肺細胞VA13細胞；WI-38 VA13亞系2RA | 沙門氏菌核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） |
人胚肺二倍體細胞；HL | 對蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）/對蝦傳染性皮下及造血組織壞死癥病毒（IHHNV）雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法 |
人腎皮質近曲小管上皮細胞；HK-2 | 原代小鼠小梁網細胞對蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）/對蝦傳染性皮下及造血組織壞死癥病毒（IHHNV）雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法 |
人臍靜脈內皮細胞；HUV-EC-C | 蝦肝腸胞蟲（EHP）/急性肝胰腺壞死病（AHPND/EMS）雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
鯉春病毒血癥病毒（SVCV）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） | 蝦肝腸胞蟲（EHP）/急性肝胰腺壞死病（AHPND/EMS）雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜，以穩定細胞狀態，然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落，再加入培養液終止消化，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當量的凍存液（基礎培養基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養液5ml混勻細胞，然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮培養基繼續培養。
