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DH5α 感受態細胞100ul*20多少錢

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  • 更新時間2019-03-21
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上海撫生實業有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫學院、復旦大學、上海交通大學醫學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫大學、南京大學,暨南大學,南京工業大學,曙光醫院、華山醫院、瑞金醫院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務,力求為我國科研事業更好的,更專業的服務!


公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。







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DH5α 感受態細胞100ul*20多少錢感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
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細胞的種類:
*種:
DH5α 感受態細胞100ul*20多少錢是凍存產品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大,一旦細胞狀態不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。的凍存是細胞培養的基本操作,不同的實驗室采用的方法略有差異,但是都會遵循慢凍速溶的宗旨。
細胞培養操作規程:
一.DH5α 感受態細胞100ul*20多少錢培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 

1-戊硫醇 1-Pentanethiol 110-66-7 其他生化試劑
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DL-丙氨酸 DL-Alanine 302-72-7 其他生化試劑
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Antimony(V) oxide 1314-60-9 其他生化試劑
硫化銨溶液 Ammonium sulfide solution 12135-76-1 其他生化試劑
檸檬酸鐵銨 Ammonium ferric citrate 1185-57-5 其他生化試劑
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甲酸銨 Ammonium formate 540-69-2 其他生化試劑
硫酸鋁,十八水合物 Aluminum sulfate octadecahydrate 7784-31-8 其他生化試劑
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茜素紅 S Alizarin red S 130-22-3 其他生化試劑
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堿式乙酸鋁 Aluminum acetate basic 142-03-0 其他生化試劑
媒介黃 1 Mordant Yellow 1 584-42-9 其他生化試劑
1-乙酰基-2-苯基肼 1-Acetyl-2-phenylhydrazine 114-83-0 其他生化試劑
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媒介橙 1 Mordant Orange 1 2243-76-7 其他生化試劑
堿藍6B Alkali blue 6B 1324-80-7 其他生化試劑
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天青 B Azure B 531-55-5 其他生化試劑
天青Ⅱ Azure II 37247-10-2 其他生化試劑
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N-氨基甲酰甲基乙磺酸 N-(Carbamoylmethyl) taurine (ACES) 7365-82-4 其他生化試劑
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5'-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽 Adenosine 5'-monophosphate disodium salt 4578-31-8 其他生化試劑
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VE-cad ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶B抗體 血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA試劑盒
ATA ELISA Kit 脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體 血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒
ACE2 ELISA Kit 蛋白激酶錨定蛋白13抗體 血管緊張素轉化酶2(ACE2)ELISA試劑盒
ACE ELISA Kit AP-1μ2抗體 血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒
aGT ELISA Kit 肥大細胞膜抑制性受體Allergin1抗體 血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒
AgtrⅠa ELISA Kit 腦鈉通道蛋白1抗體 血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)ELISA試劑盒
AT2R-Ab ELISA Kit 肌動蛋白相關蛋白2/3復合亞單位B1抗體 血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒
AT2R ELISA Kit 三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體 血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒
ATⅡR1 ELISA Kit 甲胎蛋白抗體 血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA試劑盒
ANGⅡR-1 ELISA Kit 毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體 血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒
ANG-Ⅱ ELISA Kit ATP結合盒轉運蛋白2抗體 血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
ANGⅡ ELISA Kit 肌動蛋白結合蛋白LIM蛋白3抗體 血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒
2-7 ELISA Kit 酸性鈣調蛋白3抗體 血管緊張素Ⅱ(2-7)ELISA試劑盒
ACEⅠ ELISA Kit 磷酸化CD156b抗體 血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒
ACE ELISA Kit 乙醇脫氫酶5抗體 血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACE)ELISA試劑盒
ANG-ⅠR ELISA Kit 乙醇脫氫酶6抗體 血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒
Ang-Ⅰ ELISA Kit 溶血磷脂酰基轉移酶5抗體 血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒
Ang1-7 ELISA Kit 遺傳性失明相關蛋白AIPL1抗體 血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒
DH5α 感受態細胞100ul*20多少錢ANG ELISA Kit 免疫調節蛋白AIRE抗體 血管緊張素(ANG)ELISA試劑盒
VPI ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒
VIP ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
實驗報告:
一、DH5α 感受態細胞100ul*20多少錢分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。電擊

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