Kit和PDGFRα/β抑制劑(Masitinib)正在熱銷的產(chǎn)品：ALCAM Human 人白活化粘附因子烯利 >90.0%(HPLC)
Amphiregulin Human 人角化內(nèi)分泌因子烯利 80%
Angiopoietin-2 Human 人血管生成-2烯利
APO E Human 人載脂蛋白 E4-羥-3-硝吡啶 98%
AVP Human 人抗利尿激3- 98%
BMP
產(chǎn)品介紹:
Masitinib是一種有效的Kit和PDGFRα/β抑制劑，IC50值為200nM和540nM/800nM，對(duì)ABL和c-Fms也有微弱抑制作用。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：790299-79-5 別名：AB1010 純度：99.92% 分子量：498.64 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：Kit和PDGFRα/β抑制劑(Masitinib)
英文名稱：Masitinib
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào)：FS-X10639
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
奧斯陸莫拉氏菌Cy3標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-THY1 Antibody封閉蛋白19(CLDN19)
紅緣層孔菌Cy5標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-THY1 Antibody封閉蛋白17(CLDN17)
不等彎孢Cy5.5標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-THY1 Antibody封閉蛋白16(CLDN16)
根霉Cy7標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIA1 Antibody封閉蛋白15(CLDN15)
膠韌革菌PE標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIAM1 Antibody封閉蛋白14(CLDN14)
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TICAM1 Antibody封閉蛋白12(CLDN12)
根霉PE-CY5標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TICAM1 Antibody封閉蛋白11(CLDN11)
枯草芽孢桿菌APC標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIE1 Antibody封閉蛋白10(CLDN10)
球形節(jié)桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TICAM1 Antibody封閉蛋白1(CLDN1)
側(cè)孢短芽孢桿菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMM17A Antibody糞卟啉原氧化(CPOX)
金色鏈霉菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP1 Antibody分泌型磷蛋白2(SPP2)
芽孢桿菌屬Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMM8A/DDP Antibody分泌球蛋白家族2A成員2(SCGB2A2)
大杯蕈PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP1 Antibody分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)
產(chǎn)堿假單胞菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP2 Antibody分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)
盤長(zhǎng)孢狀盤孢生物標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP1 Antibody分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)
構(gòu)巢曲霉堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗生物抗體IgGAnti-TIMP2 Antibody分泌跨膜蛋白1(SECTM1)
果糖-2,6-二磷心肌抗體Hyphomonasjohnsonii人尿道組織提取物
磷羧化2抗體干酪棒桿菌（乳酪棒桿菌）人前列腺組織提取物
果糖-2,6-二磷1抗體Methylophagamurata人腎系膜組織提取物
磷葡萄糖內(nèi)酯抗體Sphingomonasfennica人腎動(dòng)脈組織提取物
Kit和PDGFRα/β抑制劑(Masitinib)枯草芽胞桿枯草亞種 5-溴-2-羥基煙白介1
櫟小皮傘 咖啡苯乙酯白介12
大腸埃希氏桿 位辛內(nèi)酯皮質(zhì)酮;腎上腺酮
枯草芽孢桿 硫亞鈰(III)八水合物白蛋白
鍋孢霉 3-(1-萘氨基)磺鈉尿氮
栗酒裂殖酵母 1-羥基四苯基環(huán)戊二烯基(四苯基-2,4-環(huán)戊二烯基-1-酮)-μ-羥基四羰基二釕(II)促腎上腺皮質(zhì)
耐輻射奇球 化四丁基肌激
白僵 富馬鹽血管緊張Ⅱ
釀酒酵母 2-(1-金剛烷基)-4-溴苯甲固酮
臭曲霉 5--4-氟-2-總蛋白
冠突曲霉 4-溴-2,6-二氟苯甲血糖
冷桿 4-溴-2,6-二氟乳脫氫
聚生殼 N-芴甲氧羰基-D-谷 gamma-叔丁酯成纖維生長(zhǎng)因子5
海洋桿 2-羥基-4-三氟甲基嘧啶小反芻獸疫病抗體
膜醭畢赤酵母 4-乙總抗氧化能力
