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中文名稱：整合素αV抑制劑(CWHM-12)
英文名稱：CWHM-12
產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10731
產品介紹:
CWHM-12是一種有效的αV integrins抑制劑，抑制αvβ8，αvβ3，αvβ6和αvβ1，IC50分別為0.2，0.8，1.5和1.8nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：1564286-55-0 純度：98.97% 分子量：590.47 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
屎腸球菌沉默調節蛋白1抗原Anti-ECRG4 Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)
金針菇S相激相關蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)
干酪乳桿菌碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4Anti-ECRG4 Antibody人角蛋白13(CK-13)
枯斑擬盤多毛孢碳氫鈉協同轉運蛋白4-A7抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白13(CK-13)
Lactococcus sp.線粒體促凋亡蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白17(CK17)
匍匐曲霉乙酰轉運蛋白1抗原Anti-EEF1A1 Antibody人角蛋白17(CK17)
草青霉磷鈉協同轉運蛋白抗原Anti-EEF1B2 Antibody人制瘤M受體(OSMR)
Pseudarthrobacter運動神經元生存蛋白1抗原Anti-EEF1G Antibody人制瘤M受體(OSMR)
糞纖維單胞菌磷化Smad2抗原Anti-EEF1B2 Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)
污黑腐皮殼Smad4抗原Anti-EEF2K Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)
平菇新宇711Smad 7(多肽)Anti-EFEMP1 Antibody人癌蛋白誘導轉錄物3(OIT3)
少根根霉磷化SMAD(p-Ser425)抗原Anti-EEF2K Antibody人癌蛋白誘導轉錄物3(OIT3)
曲霉突觸相關膜蛋白25抗原Anti-EFEMP2 Antibody人P27蛋白(P27)
褐色諾卡氏菌Snail蛋白抗原Anti-EFNA2 Antibody人P27蛋白(P27)
北方蜜環菌因子信號傳導抑制蛋白3抗原Anti-EFNA3 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)
枝孢屬超氧化物歧化1抗原Anti-EFNB1 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)
前列腺癌相關蛋白4抗體泛養副球菌人膽管上皮癌細胞
線粒體導肽水解β抗體金黃亞種人胃腸道間質瘤細胞
富含脯蛋白15抗體日勾維腸桿菌人慢性髓系白血病細胞
香葉烯基轉移1β抗體解肝磷脂土地桿菌人永生化肝細胞
整合素αV抑制劑(CWHM-12)大腸埃希 4-(三氟甲基)芐溴鉤端螺旋體IgG
孢小克銀漢霉 二異基膦TH糖蛋白
地衣芽孢桿 4-氟三氟甲苯COL15A1
山茶盤孢 4-溴三氟甲苯對氧磷2
枯草芽孢桿枯草亞種 3,5-雙(三氟甲基)苯甲纖連蛋白1
淡紫擬青霉 3-氟三氟甲苯腎上腺
耐堿放線孢 2-甲酰基苯成纖維生長因子15
Bacillus tequilensis (甲氧基)三苯基化磷三磷腺
粟酒裂殖酵母 4'-氟-3'-乙酮一磷腺
黑曲霉 2,5-二羥基-1,4-二噻烷腺核
乙鈣不動桿 2-氟-4-甲苯過氧化氫
大腸埃希氏 5-氟-2-甲過氧化物
產氨短桿 5-氟ATP
果生鏈核盤 5-甲氧基靛紅成纖維生長因子21
根瘤 6-氟氨基轉移
