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產品介紹:
KJ Pyr9是一種新型MYC抑制劑。體外實驗中,KJ Pyr9抑制MYC的Kd值為6.5±1.0nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：581073-80-5 純度：98.98% 分子量：385.37 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：新型MYC抑制劑(KJ Pyr 9)
英文名稱：KJ Pyr 9
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10727
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
平菇2磷化增殖核多肽抗原Anti-DMGDH Antibody人活化A(ACV-A)
玫瑰單胞菌足特異蛋白抗原Anti-DMAP1 Antibody 人活化A(ACV-A)
鞘盒菌屬血小板源性生長因子-BB抗原Anti-DMGDH Antibody人神經調節蛋白1(NRG-1)
泡盛曲霉胰十二指腸同源異型盒基因抗原Anti-DMPK Antibody人神經調節蛋白1(NRG-1)
燼灰藍鏈霉菌果膠抗原Anti-DNAI2 Antibody人心鈉肽(ANP)
孢小克銀漢霉南變種肝癌高表達基因抗原Anti-DNAI1 Antibody人心鈉肽(ANP)
禾谷絲核菌腦啡肽Anti-DMTN Antibody人多巴D2受體(D2R)
光滑假絲酵母腸道肽轉運蛋白2/小肽轉運蛋白2抗原Anti-DMTN Antibody人多巴D2受體(D2R)
正青霉蛋白激R樣內質網激抗原Anti-DNAJB1 Antibody人內肽-2(EM-2)
嗜冷成對桿菌纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原Anti-DNAJB11 Antibody人內肽-2(EM-2)
枯草芽孢桿菌胃蛋白原C蛋白抗原Anti-DNAJB11 Antibody人α-內肽(α-EP)
瑞士乳桿菌過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原Anti-DNAJC17 Antibody人α-內肽(α-EP)
相思根瘤菌顆粒蛋白前體抗原Anti-DNAJB4 Antibody人抑制(INH)
豇豆慢生根瘤菌抑制/腫瘤抑制因子抗原Anti-DNAJC17 Antibody人抑制(INH)
土生類諾卡氏菌蛋白激A(多肽)Anti-DNM1 Antibody人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)
香菇尿激型纖溶原激活因子（多肽）Anti-DNAL4 Antibody人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)
蛋白激Cdelta結合蛋白抗體糖化酵母人子宮內膜癌細胞
轉錄因子RPF1抗體卡爾斯伯酵母人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞
蛋白磷2A抑制劑1抗體滅酵母小鼠神經母細胞瘤細胞
橋粒相關蛋白DRS抗體粉狀畢赤酵母Walker氏癌肉瘤256瘤株
新型MYC抑制劑(KJ Pyr 9)硫氧化檸檬胞 四己基溴化CD34分子
紅色鹽幾何形 2-對氨基苯基-2'-羥基二乙硫鹽snap-tag蛋白
布氏乳桿 1-(基硅基)-1H-苯并三唑血清淀粉樣蛋白A
枇杷假尾孢 三(4-溴苯基)白介12
平菇 1-甲基-1，4-環己二烯腫瘤壞死因子γ
枯草芽孢桿 3-溴-1,1,1-三氟酮P選擇
模擬乳粉霉酵母質控樣品(定量) 原丁酯二磷腺
黃色粘球* 3-新戊酰膽囊收縮
枯草芽孢桿 對甲苯基溴化鎂細小病IgA抗體
豬丹絲 四乙基四氟細小病IgM抗體
短波單胞 5-甲基異噁唑-4-甲血紅蛋白
鞘氨單胞屬 2-氨基-5-溴-6-萊姆病抗原
漏斗多孔 N-（4-氨酰）-L-谷基質金屬蛋白抑制因子2
熱噬淀粉芽孢桿 2-溴乙基磺鈉(SBES)同型半胱
好熱地芽孢桿 三氟磺乙酯神經調節蛋白1
