ROCK1和ROCK2抑制劑(GSK429286A)正在熱銷的產品：TF(Human Transfer factor) ELISA Kit 人轉移因子聚二 average Mn 300
CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit 人結腸癌抗原聚二 average Mn 20000
Human H-ras ELISA Kit 人H-ras聚二 avera
產品介紹:
GSK429286A是選擇性的ROCK1和ROCK2抑制劑，IC50值為14nM和63nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：864082-47-3 純度：99.13% 分子量：432.37 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：ROCK1和ROCK2抑制劑(GSK429286A)
英文名稱：GSK429286A
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10725
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
馬葡萄球菌腦腸肽28Anti-DGKB Antibody人堿性成纖維生長因子4(bFGF-4)
瑟氏泰勒蟲（盧氏株-2）咬合蛋白抗原Anti-DGKD Antibody人堿性成纖維生長因子4(bFGF-4)
枯草芽孢桿菌胚胎干關鍵蛋白抗原Anti-DGKE Antibody人性成纖維生長因子1(aFGF-1)
糞腸球菌鳥脫羧抗原Anti-DGKI Antibody人性成纖維生長因子1(aFGF-1)
大腸埃希菌小腸結腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原Anti-DGKH Antibody人凋亡相關因子配體(FASL)
玫瑰庫克氏菌嗅球蛋白1多肽抗原Anti-DGKB Antibody人凋亡相關因子配體(FASL)
杰丁畢赤酵母增食欲-A/欲激A抗原Anti-DGKZ Antibody人凋亡相關因子(FAS/CD95)
季也蒙有孢漢遜酵母縮宮受體Anti-DHPS Antibody人凋亡相關因子(FAS/CD95)
異常威克漢姆酵母食欲受體(多肽)Anti-DHPS Antibody人E選擇(E-Selectin/CD62E)
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種增殖潛能相關蛋白抗原Anti-DGKK Antibody人E選擇(E-Selectin/CD62E)
費雷生枝霉p19ARF抑癌基因抗原Anti-DHRS11 Antibody人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)
乳酒假絲酵母磷化絲裂原活化蛋白激p38抗原Anti-DHRS4 Antibody人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)
大腸埃希氏桿菌絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗原Anti-DHX8 Antibody人鼠嗜粒趨化因子(ECF)
抗生鏈霉菌腫瘤抑制基因抗原（野生型P53）Anti-DHX8 Antibody人鼠嗜粒趨化因子(ECF)
糞腸球菌突變型P53抗原Anti-DIABLO Antibody人內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)
尖孢鐮刀菌野生型p53誘導基因1抗原Anti-DIAPH2 Antibody人內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)
ATP受體抗體匍枝根霉人前列腺增生細胞
磷脂酰肌激催化亞單位A抗體聚多曲霉（薩氏曲霉）人胚腎細胞
蛋白體激活因子PA28γ抗體鏈格孢小鼠結腸癌細胞
前列腺E2受體2抗體根霉小鼠中腦多巴胺能神經元細胞
ROCK1和ROCK2抑制劑(GSK429286A)摩氏摩根 2-氟苯酮V
葡萄座腔 4-氟-3-硝苯Ⅶ
華根霉 4-氟-2-硝苯Ⅷ
乙假絲酵母 4-氟-2-甲Ⅸ
水生拉恩氏 甲-4-硝基芐酯Ⅹ
根瘤 2-氨基-5-三氟甲苯流感病抗體
解蛋白弧 2-溴-4,6-二氟苯流感病H3N2亞型
Lonsdalea quercina subsp. quercina 2-氟-1,3-二甲苯新孢子蟲病抗體
德曼鏈霉 3-氟-1,2-二甲苯血管舒緩激肽
康寧木霉 二糠基二硫α平滑肌肌動蛋白
橄欖色青霉 紅白介31
巴氏醋桿 正丁基解脲支原體抗體
盤孢屬 1,3,5-苯?？偰懼?/span>
香菇 α-安息香肟膽汁
泡盛曲霉 呋喃-3-甲鉤端螺旋體
