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大鼠腎小球系膜細胞

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  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-04-18
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限8
  • 實名認證已認證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9988
  • 人氣值256494
產(chǎn)品標簽

大鼠腎小球系膜細胞

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產(chǎn)地國產(chǎn) 加工定制 適用領(lǐng)域科研
貨號FS-01X9713
大鼠腎小球系膜細胞公司正在出售的產(chǎn)品:間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 英文名稱:MSCM-prf 規(guī)格:500 ml
間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 英文名稱:MSCM-sf-prf 規(guī)格:500 ml
間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 英文名稱:MSCM-acf-prf 規(guī)格:
間充質(zhì)干細胞成骨細胞分化培養(yǎng)基 英文名稱:MODM-prf 規(guī)格:500 ml
大鼠腎小球系膜細胞 產(chǎn)品詳情

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

產(chǎn)品屬于:

產(chǎn)品名稱:大鼠腎小球系膜細胞    

產(chǎn)品英文:HBZY-1

貨號:FS-01X9713

細胞培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài):貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格:1×106

單位:T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度(℃)37

運輸溫度(℃):常溫   

98.jpg 

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒英文名稱:Human Helicobacter pylori IgG ,Hp-IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

γ谷酰轉(zhuǎn)移(GGT) ELISA試劑盒英文名稱:Human gamma glutamyl transpeptidase,GGT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人胃粘液(GM)ELISA試劑盒英文名稱:Human Gastric Mucin,GM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

Ⅰ型膠原N末端(NTX)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人胃抑(GIP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human gastric inhibitory polypeptide,GIP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Collagen-like Bioprotein Ⅱ,HCBⅡ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人多YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒英文名稱:Human Peptide YY ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人促胃液受體(GsaR)ELISA試劑盒英文名稱:Human gastrin receptor,GsaR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人膽囊收縮/縮膽囊八(CCK-8)ELISA試劑盒英文名稱:Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒英文名稱:Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒英文名稱:Human malondialchehyche,MDA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人膽囊收縮/腸促胰(CCK)ELISA試劑盒英文名稱:Human cholecystokinin,CCK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

Ⅲ型前膠原(PⅢNP)ELISA試劑盒英文名稱:Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

Ⅰ型前膠原羧基端(PⅠCP)ELISA試劑盒英文名稱:Human procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人透明質(zhì)(HA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hyaluronic acid,HA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠腎小球系膜細胞AF10/MLLT10  髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-BCAR1(Tyr410)  磷化乳腺癌抗雌耐藥蛋白1規(guī)格: 0.1ml

CAMK1D  鈣調(diào)蛋白激CaMK1D抗體規(guī)格: 0.2ml

DDX43/CT13  腫瘤/睪丸抗原13抗體規(guī)格: 0.2ml

GIG22/DNAJC15  細胞生長抑制蛋白22抗體(甲基化控制J蛋白)規(guī)格: 0.2ml

NRG1/HRG beta 1  乳腺癌細胞分化因子P45抗體 Heregulinβ規(guī)格: 0.1ml

ID3  DNA結(jié)合抑制因子3抗體規(guī)格: 0.2ml

LC3C  微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體規(guī)格: 0.2ml
實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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