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大鼠腎小球系膜細胞

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  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-05-11
  • 廠商性質經銷商
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  • 產品數量9976
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公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。





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貨號BJ-X97226
大鼠腎小球系膜細胞公司*的商品:DNAH7 軸絲動力蛋白7抗體 規格: 0.2mlTRPM6 瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體(M亞家族) 規格: 0.2mlUCHL1/PGP9.5 神經細胞胞漿蛋白9.5抗體(蛋白基因產物9.5) 規格: 0.1mlPSME3/PA28 gamma 蛋白體激活因子PA28γ抗體 規格: 0.2mlTBCD4/TBC1D4 TBC結構域TBCD4蛋白
大鼠腎小球系膜細胞 產品詳情

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產品名稱

大鼠腎小球系膜細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

貨號

BJ-X97226

商品屬性:

名稱    大鼠腎小球系膜細胞

2.組織來源:腎組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內,微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質,由系膜細胞和系膜基質組成。腎小球系膜細胞是腎小球內非常活躍的細胞,具有分泌細胞基質、產生細胞因子、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球系膜細胞增生和基質的過多產生是多種腎小球腎炎的主要病理表現。腎小球系膜細胞的培養是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細胞的主要作用可能有:收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調節,以影響毛細血管袢的內壓和濾過率;支持作用,它填充于毛細血管袢之間,支持毛細血管的位置;吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內的大分子物質和蛋白質;分泌腎素,在腎缺血或免疫復合物沉積時,系膜細胞增生且分泌腎素。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠腎小球系膜細胞采用機械研磨法結合不同孔徑不銹鋼網篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠腎小球系膜細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R057

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

細胞培養步驟:

.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

圖片13.jpg 

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

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操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

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