生物制藥微課堂｜宿主細胞殘留蛋白分析，如何獲得更佳結果？
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LCMS分析方法越來越多的用于宿主細胞殘留蛋白（HCP）的分析，HCP分析的難點見往期wei信稿“生物制藥微課堂|第二期-宿主細胞殘留蛋白如何分析？”。如何獲得優秀的基于LC-MS的HCP分析結果? 答案將在本期分享的兩場關于HCP的LCMS分析的網絡講座，每場都有詳細的樣品前處理，LCMS方法和數據處理的詳細介紹，可謂干貨滿滿，供有需求的老師參考。
Webinar 1:
Data Visualizations for Routine Host Cell Protein Analysis by LCMS
講師介紹
博士：
Andrew Williamson
賽默飛生物制藥銷售專家
Andrew Williamson博士是賽默飛生物制藥銷售專家。在此之前，Andrew在賽默飛公司擔任蛋白質組學專家，此前他在曼徹斯特大學克里斯蒂醫院的蛋白質組學實驗室工作并管理該實驗室。在此期間，安德魯從事了許多基于腫瘤項目的蛋白質組學分析，研究zhi療的關鍵指標和生物標志物的發現。在此期間，Andrew還與合作者合作分析了多種干細胞和癌癥樣本，包括小鼠、人和誘導多能干細胞。
講師介紹
博士：
Michelle English
Protein Metrics Inc.
的成功科學家
Michelle English 博士是Protein Metrics Inc.的客戶成功科學家，在該公司，她專注于幫助客戶使用質譜對早期和后期產品表征。在加入Protein Metrics公司之前，Michelle是輝瑞公司的一名科學家，并在弗吉尼亞大學的Hunt實驗室工作。
看點：
HCP的完整解決方案及可視化的數據展示
生物藥生產過程中會產生產品不需要的宿主細胞殘留蛋白(HCP)，大部分HCP可以通過純化去除。監管指南規定在上市前必須確定生物藥中殘留的HCP水平。LC-MS技術在過去幾年中得到了快速發展，但迄今為止該技術對分析人員專業技能要求高和需要對數據進行手工分析。分析挑戰包括樣品寬動態范圍，極低的HCP豐度，差的序列覆蓋率，等等。此外，假陽性和假陰性一樣危險，會造成不能重現，這也阻礙了LC-MS成為常規的HCP分析手段。
講座關鍵點：
01.為什么LC-MS在生物藥分析中越來越常用
02.如何對非質譜專家用戶有效的展示數據
03.如何更快提供可信的結果
該報告詳細介紹了樣品前處理方法、LC-MS方法和數據處理。非變性SMART Digest酶解能去除大部分主成分，提高HCP鑒定的數目。高靈敏度和采集速度快的Orbitrap Exploris 480 質譜儀進一步提高HCP鑒定數目，并且重現性好。軟件Proteome Discoverer和Protein metrics用于數據的分析，得到可視化好的HCP鑒定和相對定量的結果和報告。
流程化的數據處理
（點擊查看大圖）
Webinar 2:
A Data-Independent Acquisition (DIA) library based approach for Host cell protein analysis on the Thermo Scientific Orbitrap platform
講師介紹
博士：
Ian Anderson
賽默飛生物制藥銷售專家
Ian Anderson博士在Allergan工作了6年多，專注于從抗體到基因zhi療載體等多種生物制藥產品的質譜鑒定。在此之前，他在SGS-M-Scan工作，開發用于表征生物藥品和生物仿制藥的新型質譜方法。
看點：
基于DIA采集模式的HCP分析
現在用于HCP分析方法，絕大部分用的是數據依賴性采集（DDA）的方法。數據非依賴性采集（DIA）與DDA相比，不丟失任何信息、靈敏度更高，適合用于HCP分析。該報告講解了基于Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos三合一質譜儀和Orbitrap Exploris 480質譜儀開發HCP的DIA方法，以及如何在兩個質譜系統設置合適參數。該報告將詳細介紹好的HCP數據庫如何建立以及構建該庫的*方式，并列舉了如何在生物制藥過程開發中使用該方法的例子。
講座關鍵點：
01.討論基于高分辨質譜平臺的HCP分析方法
02.演示使用DIA方法進行HCP的分析
03.該方法在生物制藥開發過程中應用
DIA分析LCMS平臺
本報告詳細介紹了DIA采集模式用于HCP分析的方法建立。DDA是好的建立譜圖庫的數據采集模式，數據不丟失、高靈敏度的DIA采集的數據可以檢索該譜圖庫從而得到可信的HCP鑒定結果。本報告對DDA和DIA的質譜參數設置進行了詳細的解讀，且該方法可以在Orbitrap Fusion Lumos三合一質譜儀和Orbitrap Exploris 480質譜儀相互轉移，表明該方法的穩健性好、重復性好。
DIA 用于HCP分析的實驗流程
（點擊查看大圖）
使用Orbitrap高分辨質譜平臺Exploris 480和Orbitrap Fusion Lumos，能夠實現鑒定靈敏度及動態范圍的進一步提高。那么如何進行合理的實驗設計？質譜方法的參數設置？鑒定結果可做到什么程度？這些問題都會在以上報告中給出答案，精彩不要錯過！
文末福利：
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