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商品介紹：

測定意義

蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關鍵酶之一，能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體吸收。

測定原理

本試劑盒采用3.5－二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產生的還原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5－二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內還原糖的量和反應液的顏色深度成正比。此法操作簡便、迅速、雜質干擾較小。

所需的儀器和用品

可見分光光度計、沸水浴、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

Anti-Survivin/RBITC  紅色熒光素羅丹明標記 Survivin 蛋白抗體(標記抗體)

Anti-PTN/FITC  熒光素標記多效生長因子抗體IgG

Anti-PTP-1B/FITC  熒光素標記PTP-1B蛋白抗體IgG

Anti-PTPRJ/CD148/DEP1/FITC  熒光素標記CD148抗體IgG

Anti-CD150/SLAM/FITC  熒光素標記CD150抗體IgG

Rabbit Anti-human sIgA/FITC  熒光素標記兔抗人分泌型IgA抗體

Anti-Rabbit Anti--mouse IgA/HRP  辣根過氧化物標記兔抗小鼠IgA抗體

Anti-PTTG/FITC  熒光素標記垂體腫瘤轉化基因抗體IgG

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操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。