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測定意義

ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定ATP含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態。

測定原理：

肌酸激酶催化肌酸和ATP反應生成磷酸肌酸，可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量，以此反應ATP含量。

自備儀器和用品：

分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

L-纈甲酯鹽酸鹽 99%斯皮諾素 分析標準品，≥97%Anti-MDM2  雙微體2癌基因抗體

環烷羧酸 98%水飛薊寧 分析標準品，≥98% Anti-Phospho-MDM2 (Ser166)  化雙微體2癌基因抗體

吡咯烷 99%水飛薊亭 分析標準品，≥98% Anti-MDR1/p-GP/CD243  多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體

1-四氫萘酮 97% 分析標準品，≥98%Anti-MEF2A  肌增強因子2抗體

鎢酸銨 99.99% (metals basis)茵芋苷 分析標準品，≥98%Anti-Phospho-MEF2A (Thr312)  化肌增強因子2抗體

鎢酸銨 AR,99%知母皂苷元 分析標準品，≥98% Anti-Phospho-MEF2A (Ser408)  化肌增強因子2抗體

仲鎢酸銨 99.95 %千金藤堿  分析標準品，≥98%Anti-Megsin  蛋白抑制劑B7抗體

鉬酸銨，四水 AR五味子素 分析標準品，≥98%Anti-Melamine  三聚抗體

ATP含量HPLC法檢測試劑盒聚烯酰 非離子型，分子量：200萬-1400萬絲氨蛋白/線粒體絲氨蛋白多肽抗原

N-鄰 99%離子鈣接頭蛋白抗原

蘿卜硫素 90%小腸型脂肪結合蛋白抗原

異龍腦酯 95%干擾素誘導跨膜蛋白1抗原

亞鈉 80%干擾素-α抗原（人）

N,N-二乙-2--1,4- 99%干擾素-gamma受體1抗原

超細球形銅粉 99.9%，D50(0.2～0.55μm) 胰島素樣生長因子結合蛋白-2（多肽）

2,4-二-3,5-二硝三氟 97%胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗原

2,4,5-三嘧 98%胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原

2-酰酯 98%KB抑制蛋白β(多肽)

氨乙縮二 97%KB抑制蛋白α抗原

4-乙烯  98% 白介素12抗原（白介素-12）

納米氮化鋁 99.9% metals basis,50nm白介素12抗原(人)

六方氮化 99.9% metals basis,1～2μm白介素-12受體β2抗原

碳化 1-10 μm，98%白介素13抗原

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。