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轉氫酶1紫外分光光度法檢測試劑盒

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 09:27:58瀏覽次數:458次

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貨號 GOY-01S6566
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全組

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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商品屬性:

產品名稱

轉氫酶1紫外分光光度法檢測試劑盒

規格

50管/48樣

檢測方法

紫外分光光度法

貨號

GOY-01S6566

商品介紹:

測定意義

TH位于線粒體的內膜上,又稱為線粒體復合體六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉化,調節線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應稱為TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

測定原理:

NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來計算TH-2活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

1-丁基-3-甲基咪唑辛鹽 99%4-羥基苯甲酰肼 98%Anti-5-HT/RBITC  紅色羅丹明標記5-羥色抗體IgG

1-丁基-3-甲基咪唑鹽 95%草酰乙酸 98%Anti-5-HTR1A/FITC  熒光素標記5-羥色受體1A抗體IgG

5-溴異喹啉 98%無水草酸  anhydrous, 99.0%Anti-5-HTR1B /FITC  熒光素標記5-羥色受體1B抗體IgG

5-溴-7-氮雜 98%無水草酸 AR,98%Anti-5-HTR2A/FITC  熒光素標記5-羥色受體2A抗體IgG

N-(叔丁氧羰基)-1,4-丁二 97%無水草酸 99.999% metals basisAnti-5-HTR2B/FITC  熒光素標記5-羥色受體2B(5-HT/serotonin R2B)抗體IgG

N-丁基溴化吡 99%無水草酸 99.99% metals basisAnti-5-HTR3/FITC  熒光素標記5-羥色受體3抗體IgG

1-丁基-3-甲基咪唑溴鹽 97%1-重氮-2-萘酚-4-磺酸 98%Anti-5-HTR4/FITC  熒光素標記5-羥色受體4抗體IgG

1-丁基-3-甲基咪唑四氟酸鹽 97%肼黃 Biological stainAnti-5-LOX/FITC  熒光素標記5-脂氧合抗體IgG

轉氫酶1紫外分光光度法檢測試劑盒乙鋅,二水 AR,99.0%貓p27核心抗原(P27)免疫試劑盒F-box蛋白家族FBXO18抗體MIF  巨噬移動抑制因子抗體

氧化鋅 AR,99%貓5羥色/血清素/血清(5HT/ST)免疫試劑盒FRG2B蛋白抗體MIER2  中胚層誘導早期反應蛋白2抗體

硫鋅,七水  99.995% metals basis馬ELISA試劑盒FAM71A蛋白抗體Midnolin isoform Protein 1  中腦核仁蛋白1抗體

堿式碳鋅 AR,57.5%馬轉化生長因子β2(TGFB2)免疫試劑盒FAM83F蛋白抗體MIDN  中腦核仁蛋白抗體

硫銅,五水 高純級馬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒FBXL17蛋白抗體Midkine  中期因子/肝素結合生長因子抗體

70%水溶液馬孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒FCHSD1蛋白抗體MID2/RNF60/Midline-2  環指蛋白60抗體

硫鎳,七水  GR,99%馬2,3-雙加氧1(IDO1)免疫試劑盒FBXL5蛋白抗體MID1/Midline-1/RNF59  環指蛋白59抗體

溴化鎳 22.5%水溶液馬胰腺甘油三酯脂(PNLIP)免疫試劑盒FBXL12蛋白抗體MICS1  生長激素誘導跨膜蛋白抗體(源性蛋白2)

溴化鎳 99%馬血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒FBXL3蛋白抗體Microsporidia protien  蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體

化鎳,六水 AR,98%馬血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒F-box蛋白相關蛋白11抗體Microcephalin 1/BRIT1  小腦癥因1/認知相關蛋白抗體

三氧化二鈷 CP,98.5%馬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒FGFR1癌因伴侶蛋白2抗體MICB  MHC I類鏈相關蛋白B

三氧化二鈷 AR,99.0%馬血管內皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒成纖維生長因子受體底物2抗體MICA/MHC I  MHC I類鏈相關蛋白A/組織相容性復合物1抗體

氨磺鈷  98.5%馬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒FNBP1L蛋白抗體MIC1/C18orf8  結腸癌相關蛋白MIC1抗體

乙鈷,四水 AR,99.5%馬C(VC)免疫試劑盒GATA結合蛋白2伴侶蛋白抗體MIA2  黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體

乙鈷,四水 ACS馬A(VA)免疫試劑盒CD349抗體MHC Class II/MRC OX-6  組織相容性復合體2抗體


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