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測(cè)定意義

CA又稱枸櫞酸，廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中，是生物體內(nèi)重要的有機(jī)酸。CA也存在于線粒體基質(zhì)中，是三羧酸循環(huán)第一步反應(yīng)的產(chǎn)物，與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關(guān)。

測(cè)定原理

酸性條件下，檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+，在545nm處有特征吸收峰；通過測(cè)定545nm吸光值的增加，即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備

可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

ZCWCC1抗體Anti-MT-CO1 AntibodyAMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次規(guī)格

鋅指蛋白300抗體Anti-MT-ND4 Antibody接頭 DNA（Sal I-Sma I）5nmol規(guī)格

鋅指蛋白ZBTB39抗體Anti-MTA2 Antibody即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次圖片

鋅指蛋白201抗體Anti-MTA1 AntibodyXL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)0.1mL×10圖片

鋅指蛋白Zic2抗體Anti-MTOR AntibodyTuner（DE3） 感受態(tài)0.1mL×10圖片

鋅指蛋白Zdhhc18抗體Anti-MTOR AntibodyLBA4404 農(nóng)桿感受態(tài)10×100μL規(guī)格

鋅指蛋白Zdhhc12抗體Anti-MTDH Antibody(原貨號(hào)PB0309)即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片

著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體Anti-MTR Antibody6nt 隨機(jī)引物 （ 抗水解 ），0.5mM100μL圖片

檸檬酸（CA）含量可見分光光度法檢測(cè)試劑盒黃草靈Anti-ARIP2a/FITC  熒光素標(biāo)記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgG小鼠表皮調(diào)節(jié)素(EREG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

嘧菌酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-ARIP2B/FITC  熒光素標(biāo)記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgG小鼠α1抗胰蛋白(α1-AT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

嘧菌酯Anti-Aromatase P450/FITC  熒光素標(biāo)記芳香化蛋白抗體IgG小鼠質(zhì)金屬蛋白14(MMP-14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

烯唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.5%Anti-Aromatase P450/FITC  熒光素標(biāo)記芳香化/色素P450/P450抗體IgG小鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

烯唑Anti-ART/FITC  熒光素標(biāo)記膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子GDNF的一種抗體IgG小鼠可溶性CD14(sCD14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

環(huán)戊酮-2-羧乙酯 97%Anti-ASCL1/MASH1 /FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)母特異性轉(zhuǎn)移因子抗體IgG小鼠免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

4(5)-羥咪唑鹽鹽 98%Anti-ASIC1/BNaC2/FITC  熒光素標(biāo)記敏感離子通道1抗體IgG小鼠烯式酮羧激1(PCK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

2--4-氧乙 >98.0%(T)Anti-ASK1/MAPKKK5 /FITC  熒光素標(biāo)記凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1/絲裂原活化蛋白激激激5抗體IgG小鼠平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

多效唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(HPLC)Anti-ASK1(phospho Ser83) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體IgG小鼠硬骨素(SOST)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

多效唑Anti-phospho-ASK1(Thr845) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體IgG小鼠卵脂膽固酰轉(zhuǎn)移(LCAT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

戊炔草 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-ASK1(phospho Ser967) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體IgG小鼠III型前膠原氨端原肽(PⅢNP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

炔酰草Anti-ASPP1/FITC  熒光素標(biāo)記p53凋亡激蛋白1抗體IgG小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硫氫化鈉，水合 68-72 %Anti-ASPP2/FITC  熒光素標(biāo)記P53凋亡激蛋白2抗體IgG小鼠CD163分子(CD163)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

二 97%Anti-AT/AGT /FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素原抗體IgG小鼠二肽肽IV(DPP4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

4-()吡鹽鹽 97%Anti-AT1/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素I抗體IgG小鼠因子受體(EGFR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。