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貨號 | GOY-01S6578 |
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操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產品名稱 | |
規格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6578 |
商品介紹:
測定意義
PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是丙酮酸脫氫酶復合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭生成-TPP,把糖酵解和三羧酸循環連接起來。
測定原理
PDH催化丙酮酸脫氫,同時還原WST-8產生黃色物質,從而導致450nm光吸收的增加。
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
Alexa Fluor 555標記的小鼠抗牛IgGAnti-TF Antibodyartemether71963-77-4說明書
Alexa Fluor 647標記的小鼠抗牛IgGAnti-TF Antibody朝藿定B110623-73-9說明書
PE-Cy5.5標記的小鼠抗牛IgGAnti-TF Antibody(原貨號PB0879)黃連堿氯6020-18-4品牌
羅丹明標記的小鼠抗牛IgGAnti-TFAP2A Antibody氧化槐果堿26904-64-3價格
FITC標記的小鼠抗牛IgGAnti-TFAM Antibody人參皂苷F362025-50-7品牌
堿性(AP)標記的小鼠抗牛IgGAnti-TFAM Antibodysakakin21082-33-7說明書
膠體金標記的小鼠抗牛IgGAnti-TFEB Antibody白蘚堿484-29-7價格
Cy3標記的小鼠抗牛IgGAnti-TFF1 Antibody知母皂苷A341059-79-4規格
丙酮酸脫氫酶(PDH)可見分光光度法 99.99% metals basis化蛋白激C抗體 PKC εBMP4 骨形態發生蛋白4抗體
2-乙蒽醌 97%血小板源性生長因子C抗體BMP11 骨形態發生蛋白11抗體
鄰氧 CP,97%血小板源性生長因子D(脊髓源性生長因子B)BMP10 骨形態發生蛋白10抗體
對氧 97.0%非典型蛋白激C特定相互作用蛋白抗體BMP1 骨形態發生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切抗體
4-異酯 98%原鈣粘蛋白13抗體BMI-1/PCGF4 組蛋白相關Bmi1抗體
3,4-二異酯 97% 26S蛋白調節亞型抗體Bmf/Bcl2 modifying factor Bcl2蛋白修飾因子抗體
3-氨-4-戊 98%原鈣粘蛋白β11抗體BMAL1 芳香烴受體核轉位蛋白樣1抗體
2-酚 99%軸周蛋白PRX抗體Blood Group Lewis a 血型抗原Lewis A抗體
對 98%豬藍耳病病GP5蛋白抗體Blood Group Lewis a 血型Lewis a抗體
2- 98%p21激活激1抗體Blood Group Kell Antigen/CD238 凱爾血型糖蛋白CD238抗體
1,4-二 97%蛋白質二硫鍵異構抗體Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前體蛋白抗體
2,2'-二硫雙(5-硝吡) 97%脯氨酰羥化抗體BLNK B淋巴連接蛋白抗體
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