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商品介紹：

測(cè)定意義

MCS廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中，與檸檬酸合酶（CS）共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)。

測(cè)定原理：

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰，進(jìn)一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸；該反應(yīng)促使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB，在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無(wú)水乙醇和蒸餾水

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

抗抗體 IgM(間接法二步法)Anti-Mevalonate Kinase Antibody人血紅蛋白C（HbC）elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠分泌型磷脂A2Anti-MFAP5 Antibody人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3（VEGFR3/Flt4）elisa定量檢測(cè)試劑盒

兔骨形成蛋白Anti-MIA Antibody人嗅素4（OLFM4）elisa定量檢測(cè)試劑盒

人干擾素調(diào)節(jié)因子Anti-MGST3 Antibody人肥胖抑制素（OB）elisa定量檢測(cè)試劑盒

鯉魚(yú)卵黃蛋白原Anti-MGST2 Antibody人性別決定區(qū)Y框蛋白3（SOX3）elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠CD3分子Anti-MIA2 Antibody人蛋白3（PR3）elisa定量檢測(cè)試劑盒

魚(yú)類(lèi)促性腺釋放Anti-MIA Antibody人嗜酸粒趨化因子受體（ECFR）elisa定量檢測(cè)試劑盒

兔骨保護(hù)素Anti-MID1 Antibody人熱休克蛋白90（HSP-90）elisa定量檢測(cè)試劑盒

甲基檸檬酸合酶(MCS）可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒噁唑 98%跨膜蛋白TMED4抗體

2-噻吩乙酰 98%狀受體相關(guān)蛋白3抗體

4-辛炔 99%味覺(jué)受體蛋白家族2亞9抗體

十八 ≥97.0% (GC)肥大類(lèi)胰蛋白β2

草酰 98%化酪氨激B抗體

油 99%粘附分子1抗體

油 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (GC)跨膜蛋白16A/鈣激活離子通道抗體

1,7-辛二炔  98%腫瘤壞死因子-α抗體

十八烷 99%腫瘤蛋白P53誘導(dǎo)蛋白11抗體

十八烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)味覺(jué)2型受體蛋白家族49抗體

十八烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)早期未分化視網(wǎng)膜及晶狀體蛋白EURL抗體

酮三化膦 99%特異激底物蛋白抗體

丁位辛內(nèi)酯  98%微管相關(guān)同源蛋白TPX2抗體

4-戊烯 95%神經(jīng)死亡誘導(dǎo)蛋白激抗體

鍺試劑 97%微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。