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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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中性轉(zhuǎn)化酶(NI)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-27 12:58:00瀏覽次數(shù):159次

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elisa檢測(cè)試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
PCR試劑盒
培養(yǎng)基
感覺態(tài)細(xì)胞
PCR檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
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科研抗體
科研菌種
生化檢測(cè)試劑盒
科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01S6712
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:桃葉珊瑚苷 479-98-1 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
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CA

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

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商品屬性:

產(chǎn)品名稱

中性轉(zhuǎn)化酶(NI)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒

規(guī)格

50管/24樣

檢測(cè)方法

可見分光光度法

貨號(hào)

GOY-01S6712

商品介紹:

測(cè)定意義

蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。                          

NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。

測(cè)定原理:

NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計(jì)算NI活性

自備用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血35ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔510分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

Pseudomonas tolaasii苯酸-2-羥化檢測(cè)試劑盒

Pseudomonas sp.無色花青素還原檢測(cè)試劑盒

Pseudomonas fluorescens一氧化氮合成檢測(cè)試劑盒

Pseudomonas fluorescens木聚糖檢測(cè)試劑盒

Bacillus subtilis苷油酸脫氫檢測(cè)試劑盒

Stenotrophomonas maltophilia乙酰CoA檢測(cè)試劑盒

Pseudomonas putidaRubisco活化檢測(cè)試劑盒

Pseudomonas fluorescens果糖-1,6-二檢測(cè)試劑盒

中性轉(zhuǎn)化酶(NI)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFB3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠CD34分子(CD34)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

猴子巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒*直銷

高分子量脂聯(lián)素(HMW Adiponectin)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠神經(jīng)肽W(NP-W)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠組織因子(TF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

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