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上海撫生實業有限公司
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當前位置:上海撫生實業有限公司>>PCR相關試劑>>恒溫擴增系列>> Bst 4.0 SYBR Green Bead

Bst 4.0 SYBR Green Bead

參  考  價:3822
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質

    經銷商

  • 所在地

    上海市

規格

100Tx25μl 3822元 15盒可售

更新時間:2023-11-06 13:28:50瀏覽次數:244次

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貨號 A-PJ1011 分類 恒溫擴增系列
規格 100Tx25μl 品牌 撫生
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公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產品介紹:

Bst 4.0 SYBR Green Bead該制品為全體系凍干微球制品,內含恒溫擴增所用的反應緩沖液、SYBR Green 熒光染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時只需要加入引物、模板即可進行核酸恒溫擴增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進行恒溫擴增。該制品是進行 LAMP 及RT-LAMP 擴增反應的試劑。
SYBR Green 系列產品為實時熒光檢測的專用試劑,可直接在恒溫熒光儀或定量 PCR 以上進行 LAMP 反應擴增。
儲存:-20℃保存 2 年;室溫(25℃)保存>6 個月。
使用凍干微球進行全擴增體系用品的制備方法:將優化的擴增引物分裝于 0.2 ml EP 管底部,于 70-80℃條件烘干1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已經含有干燥的擴增引物,再加入一粒凍干微球即可制備成全擴增體系干燥品,該干燥品無需冷鏈運輸,可長期保存。
反應體系說明:每一個凍干微球為按照 25 μl 反應體系建立,在使用時只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可進行反應。
使用實例,進行 LAMP 熒光擴增
1. 配制熒光 LAMP 反應體系在 0.2 ml EP 反應管中加入下述試劑
Bst 4.0 SG Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到液體總量 25 μl
10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4-8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。
2. 反應體系配好后,置于熒光定量 PCR 儀中于 65°C進行反應 15~30min。1min 收集一次熒光信號。讀取擴增曲線進行陰性和陽性判讀。
3. 根據熒光擴增曲線判讀陽性和陰性。
注意事項:
(1)關于礦物油的使用,在配制完 LAMP 反應體系后,可加入一滴礦物油覆蓋于反應液上部,可以有效的減少氣溶膠的污染。實驗證明礦物油并不影響機器的熒光數值讀取。
(2)關于擴增曲線的異常:由于 LAMP 擴增速度較快,熒光信號讀取可能存在矯正計算問題,這與熒光設備的軟件算法有管。在有些熒光 PCR 儀上,在相對熒光模式下,表現出曲線飛峰、終點曲線下降的問題。此時調整到原始熒光值模式下觀察結果,或致電相應設備供應商進行咨詢。


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