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上海撫生實業有限公司
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當前位置:上海撫生實業有限公司>>PCR相關試劑>>PCR相關>> 2XRAPA HiFi PCR Mix

2XRAPA HiFi PCR Mix

參  考  價:468 - 3900
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質

    經銷商

  • 所在地

    上海市

規格

1ml 468元 15盒可售

10ml 3900元 15盒可售

更新時間:2023-11-06 13:46:51瀏覽次數:267次

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貨號 A-PJ1029 分類 PCR相關
規格 1ml、10ml 品牌 撫生
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公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產品介紹:

2XRAPA HiFi PCR Mix

 RAPA HiFi DNA 聚合酶,其來源于高保真 DNA 聚合 酶,并加入了增強的延伸結構,使其具有超保真性能(~280 倍 Taq)、長片段擴增能力、高產量。長片段擴增能力,使用 該酶可輕松擴增 8kb 的基因組 DNA、20kb 的λDNA、8kb 的 cDNA。該酶具有 6kb/min 以上的延伸速度。該 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、強 3’-5’的外切酶活性,產物為平末 端。

特點和用途
(1) 超保真擴增:~280 倍 Taq 的保真性能,是載體構建、點突變、NGS 模板擴增、基因合成的最佳用酶。
(2) 快速擴增:具有 6kb/min 的擴增能力。
(3) 長片段擴增:質粒、λDNA 等簡單模板可以有效擴增>20 kb,基因組可以有效擴增>8 kb,cDNA 可以有效擴增>8kb。
儲存:長期儲存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 個月)保存。
使用方法
1. 按下表配制反應體系并混合均勻:
2×RAPA HiFi PCR Mix 12.5 μl
上游引物(10 μM) 1 μl
下游引物(10 μM) 1 μl
模板 DNA 1-250 ng
ddH2O up to 25 μl
*模板 DNA 用量參數(25 μl 反應體系)
5-250 ng Genomic DNA
 0.1-10 ng Plasmid DNA
 1-2 μl cDNA from RT reaction
2. PCR 擴增循環參數
(1)擴增片段<5kb 時采用如下程序
循環數 溫度 時間
1
st Cycle 95°C 1min
25-35 Cycles
95°C 30s
50~60°C 30s
72°C 6kb/min
Last Cycle 72°C 2min
(2)擴增片段>5kb 時采用如下程序
循環數 溫度 時間
1st Cycle 92°C 1min
25-35 Cycles
92°C 10s
50~60°C 30s
72°C 2-3kb/min
Last Cycle 72°C 2min
3. 電泳:1% 瓊脂糖凝膠電泳,上樣 5 μl,電泳結束在紫外燈下檢測條帶。
4. 注意事項:(1)當模板 GC 含量>65%時,請添加5× Q-Solution(Cat. No.: A3002)。(2)當擴增片段<1kb 時,延伸時間可直接使用 15s,當擴增片段>5kb 時,按照2-3kb/min 的延伸時間進行設置,能獲得更高的產量。(3)由于不同的 PCR 管其導熱性能有所不同,通常 PCR 采用25μl 體系可以獲得更高的產量。



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