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PCR反應假陽性結果產生原因及解決方法

時間：2024/3/11閱讀：568
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假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。

產生的原因有：

①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；

②靶序列太短或引物太短；

③靶序列或擴增產物的交叉污染。

解決方法有：操作輕柔，防止靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外造成污染；除酶及不能耐高溫的物質外，所有試劑或器材高壓消毒；離心管及加樣槍頭等一次性使用。必要時，可在加標本前，將反應管和試劑用紫外光照射，以破壞存在的核酸。


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