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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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PGK3磷酸甘油酸激酶檢測試劑盒微量法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-11 15:18:07瀏覽次數(shù):219次

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貨號(hào) FS-01S63499
PGK3磷酸甘油酸激酶檢測試劑盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:短鏈脫氫/還原家族4樣2蛋白抗體cath-L/CL /FITC 熒光標(biāo)記組織蛋白L抗體IgG
DDRGK1蛋白抗體Cathepsin B/FITC 熒光標(biāo)記兔抗組織蛋白B抗體IgG


公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:PGK3磷酸甘油酸激酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號(hào):FS-01S63499
商品介紹:

測定意義

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),催化1,3-二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸甘油酸,產(chǎn)生1分子ATP,具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能,廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。

測定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

粗酶液提取:

1、細(xì)胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
綿羊色P450氧化還原(CPR)聯(lián)免疫試劑盒 GlaciimonasMouse IL-2sRβ/CD122 (Soluble Interleukin-2 Receptor) ELISA Kit

綿羊B瘤因子3(Bcl-3)聯(lián)免疫試劑盒 異常漢遜酵母異常變種Mouse sMHC-1 (soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit

綿羊骨性磷(BALP)聯(lián)免疫試劑盒 聚生殼Mouse sMHC-2 (soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit

綿羊谷脫羧抗體(GAD-Ab/Anti-GAD)聯(lián)免疫試劑盒三亞布勒擔(dān)子酵母Mouse sPECAM-1 (Soluble Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit

綿羊胰脂肪(PL)聯(lián)免疫試劑盒 桃色青霉Mouse S-100 (Soluble protein-100) ELISA Kit

綿羊α1連接(CTNNα1)聯(lián)免疫試劑盒玫瑰單胞Mouse TRAIL/TNFSF10 (Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit

綿羊c-sis聯(lián)免疫試劑盒 棘孢木霉Mouse SSTR1 (Somatostatin Receptor 1) ELISA Kit  

綿羊皮膚橋蛋白(DPT)聯(lián)免疫試劑盒 光黑腹Mouse SST (Somatostatin) ELISA Kit

綿羊性T相關(guān)抗原4(CTLA4)聯(lián)免疫試劑盒  凍膠假絲酵母Mouse SPOP (Speckle Type POZ Protein) ELISA Kit  

綿羊巨噬炎性蛋白5(MIP-5)聯(lián)免疫試劑盒湖底肉桿Mouse SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit  

綿羊信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT56)聯(lián)免疫試劑盒金灰青霉Mouse SCCA2 (Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit   

綿羊電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽(ETFβ)聯(lián)免疫試劑盒 Acinetobacter preuotii sp.Mouse SCFR (Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit

綿羊胰腺再生蛋白3α(REG3α)聯(lián)免疫試劑盒門多薩假單胞Mouse SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit  

綿羊甲胎蛋白(αFP)聯(lián)免疫試劑盒 黃叉曲霉Mouse SREBP (Sterol Regulatory Element Binding Protein) ELISA Kit

綿羊肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)聯(lián)免疫試劑盒 核青霉Mouse SDF1 (Stromal Cell Derived Factor 1) ELISA Kit  
PGK3磷酸甘油酸激酶檢測試劑盒微量法酰基A脫氫中鏈抗體Human LIMK1(LIM domain kinase 1) ELISA Kit抑制B(INH-B)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人

酰基A脫氫短鏈抗體Human LIMS1 ELISA Kit17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人

過氧化物酰基A氧化1抗體Human LIMK2 ELISA KitL-亮甲酯鹽鹽

磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體Human LGI3 ELISA Kit人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA試劑盒,

轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱和絲富含核蛋白1)Human LGI2 ELISA Kit人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)B(CyPB)ELISA試劑盒,

有絲分裂激A/B/C抗體Human LGI2 ELISA Kit人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒,

蛋白酪激ATK抗體Human LIMS1 ELISA Kit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒,

長鏈脂肪A連接1/2抗體Human LIMK2 ELISA Kit小鼠γ基丁(GABA)ELISA試劑盒,

 


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