產(chǎn)品名稱 | 原代大鼠滑膜成纖維細(xì)胞 | 英文名稱 | Rat Synovial Fibroblast Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1455 |
組織來源 | 滑膜組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%YI蛋白酶大鼠滑膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
大鼠滑膜成纖維細(xì)胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu)，各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣鳎洳±砀淖兝奂瓣P(guān)節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變。滑膜細(xì)胞是構(gòu)成滑膜層的最大細(xì)胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細(xì)胞)、B型(成纖維樣滑膜細(xì)胞)以及C型(樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞)細(xì)胞組成。滑膜細(xì)胞主要功能：①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān)；②滑膜細(xì)胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠滑膜成纖維細(xì)胞采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠滑膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞 | LX-2人肝星形細(xì)胞 |
LX-2+GFP人肝星形細(xì)胞+GFP | 幼蟲芽胞桿（美洲蜂幼蟲腐臭病）探針法熒光定量PCR試劑盒 |
Mahlavu 人肝癌細(xì)胞 | 蠟樣芽胞桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞 | 炭疽芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MCF-7人乳腺癌細(xì)胞 | 蠟狀芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MCF-7/Adr人乳腺癌耐藥細(xì)胞 | 芽孢桿通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MCF-7+luc人乳腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記 | 溫和氣單胞探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；BCL-10 | 滅鮭氣單胞探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MDA-MB-157人乳腺癌細(xì)胞 | 枯草芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞 | 芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X細(xì)胞+GFP | 地衣形芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MDA-MB-231+LUC人乳腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記 | 肉孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MDA-MB-361人乳腺癌細(xì)胞 | 原代大鼠滑膜成纖維細(xì)胞神經(jīng)肉孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
MDA-MB-415人乳腺癌細(xì)胞 | 小孢子酒曲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
牡蠣皰疹病毒(OsHV)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 禽白血病病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
