產(chǎn)品名稱 | 原代人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞 | 英文名稱 | Human Endometrial Mesenchymal Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1354 |
組織來源 | 子宮組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
人子宮內(nèi)膜間質(zhì)分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的最內(nèi)層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜間質(zhì)采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;MKM150-2 | 小鼠成纖維細(xì)胞包裝細(xì)胞;pA317(pLCDSN) |
小鼠成纖維細(xì)胞包裝細(xì)胞;pA317 C1 | 腦膜炎敗血金黃桿菌PCR檢測試劑盒 |
小鼠骨髓瘤細(xì)胞系; Lys30-51VH/Hu | 中山病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB Hepama-1 | 牛仰口線蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠B淋巴細(xì)胞系;RMS-S-B 5101 | 禽傳染性法氏囊病毒(IBDV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;ZUC3 | 羊仰口線蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;ZUB4 | 布尼亞維拉病毒PCR檢測試劑盒 |
人子宮頸表皮癌細(xì)胞;ME-180 | 洋蔥伯克氏菌PCR檢測試劑盒 |
鼠頰黏膜鱗癌細(xì)胞;Rca-B | 肺炎嗜衣原體PCR檢測試劑盒 |
鼠舌黏膜鱗癌細(xì)胞;Rca-T | 雞貧血病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;N-176-15 | 唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;D12E9F11 | 山羊皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;BDRPDP | 原代人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞封閉毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;MabHS1 | 犬瘟熱病毒PCR檢測試劑盒 |
森林腦炎病毒(蜱傳腦炎病毒)檢測試劑盒 | 克柔念珠菌PCR檢測試劑盒 |
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。