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| 產品名稱 | 人膀胱癌細胞：5637 |
| 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
| 分類 | 細胞系 |
| 貨號 | GOY-01X0002 |
商品介紹：
| 名稱5637 (人膀胱癌細胞) (STR鑒定正確) 種屬人類 年齡（性別）男性，68歲 組織來源膀胱；癌 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述5637細胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 生物安全等級1 生長培養基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~24-36小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. 注意事項該細胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細胞收縮變圓，輕拍培養瓶側邊，細胞可以滑落方可終止消化。 |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
AR42J (大鼠胰腺外分泌細胞) 大鼠胰腺外分泌細胞：AR42J 1×10?cells/T25培養瓶
ARPE-19 (人視網膜上皮細胞) 人視網膜上皮細胞：ARPE-19 1×10?cells/T25培養瓶
AsPC-1 (人轉移胰腺腺癌細胞) 人轉移胰腺腺癌細胞：AsPC-1 1×10?cells/T25培養瓶
AtT-20 (小鼠垂體瘤細胞) 小鼠垂體瘤細胞：AtT-20 1×10?cells/T25培養瓶
B16 (小鼠黑色素瘤細胞) 小鼠黑色素瘤細胞：B16 1×10?cells/T25培養瓶
Bcap-37 (人乳腺癌細胞) 人乳腺癌細胞：Bcap-37 1×10?cells/T25培養瓶
BEL-7402 (人肝癌細胞) 人肝癌細胞：BEL-7402 1×10?cells/T25培養瓶
BEL-7404 (人肝癌細胞) 人肝癌細胞：BEL-7404 1×10?cells/T25培養瓶
BGC-823 (人胃腺癌細胞(低分化)) 低分化：BGC-823 1×10?cells/T25培養瓶
BHK-21 [C-13] (倉鼠腎成纖維細胞) 倉鼠腎成纖維細胞：BHK-21 [C-13] 1×10?cells/T25培養瓶
BIU-87 (人膀胱癌細胞) 人膀胱癌細胞：BIU-87 1×10?cells/T25培養瓶
BRL 3A (大鼠肝細胞) 大鼠肝細胞：BRL 3A 1×10?cells/T25培養瓶
BNL CL.2 (小鼠胚胎肝細胞) 小鼠胚胎肝細胞：BNL CL.2 1×10?cells/T25培養瓶
BRL (大鼠肝細胞) 大鼠肝細胞：BRL 1×10?cells/T25培養瓶
BS-C-1 (非洲綠猴腎細胞) 非洲綠猴腎細胞：BS-C-1 1×10?cells/T25培養瓶
BT-474 [BT474] (人乳腺導管癌細胞) 人乳腺導管癌細胞：BT-474 [BT474] 1×10?cells/T25培養瓶
BT-549 (人乳腺管癌細胞) 人乳腺管癌細胞：BT-549 1×10?cells/T25培養瓶
BxPC-3 (人原位胰腺腺癌細胞) 人原位胰腺腺癌細胞：BxPC-3 1×10?cells/T25培養瓶
C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細胞) 小鼠乳腺腫瘤細胞：C127 [C-127] 1×10?cells/T25培養瓶
C2C12 (小鼠成肌細胞) 小鼠成肌細胞：C2C12 1×10?cells/T25培養瓶
血管緊張素1轉換酶抑制劑抗體
拮抗凋亡轉錄因子抗體
α-1抗胰抗體
α-1抗體
ATP結合蛋白家族6抗體
三磷酸腺苷結合盒亞家族G1抗體
脂聯素受體2抗體
ANGEL1蛋白抗體
ANGEL2蛋白抗體
ANKLE2蛋白抗體
睪丸特異性錨樣蛋白1抗體
錨蛋白重復結構域蛋白13B抗體
錨蛋白重復結構域蛋白20A1抗體
錨蛋白重復結構域蛋白20A3抗體
錨蛋白重復結構域蛋白22抗體
錨蛋白重復結構域蛋白50抗體
氫離子轉運ATP合成酶6G抗體
錨蛋白重復結構域蛋白26抗體
錨蛋白重復結構域蛋白26抗體
丙型肝炎病毒核結合蛋白-1抗體
人膀胱癌細胞：5637芳香基硫酸酯酶K抗體
神經元突觸前膜蛋白抗體
錨定蛋白G抗體
肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
整合素樣金屬蛋白酶與型抗體
