1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
產品名稱 | HMEC-1 細胞專用培養基 | 貨號 | GOY-XP4579 |
規格 | 1*125ml/500ml | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
產品介紹
由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持HMEC-1細胞最佳的生長狀態。
本產品中已包含HMEC-1細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于HMEC-1細胞的培養。
產品主要成分
MCDB131 培養基 445 mL
特級胎牛血清 50 mL
HEGF 10ng/mL
P/S青霉su-鏈霉su 5 mL
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法：按照對應保存條件保存12個月，配置好的培養基2℃～8℃,保存2個月；
質量控制
人惡性黑色素瘤細胞帶熒光素酶SK-MEL-2+luc（STR鑒定） | RWPE-2人前列腺正常細胞專用培養基 |
人系膜細胞UM-Chor1(STR鑒定正確) | SAOS-2人成骨肉瘤細胞專用培養基 |
人子宮內膜癌細胞Ishikawa(STR鑒定正確) | SBC-2人小肺癌細胞專用培養基 |
HKb20 細胞專用培養基 | SCaBER人膀胱鱗癌細胞專用培養基 |
人急性髓系白血病細胞SKNO-1(STR鑒定正確) | SCC-9人類鱗狀上皮舌癌細胞專用培養基 |
人視網膜色素上皮細胞 D407(STR鑒定正確) | SCC-25人口腔鱗癌細胞專用培養基 |
人結腸癌細胞LOVO(STR鑒定正確) | SHP-77人小肺癌細胞專用培養基 |
人結直腸腺癌細胞帶熒光素酶LS174T+LUC(STR鑒定正確) | sh-sy5y人神經母瘤細胞專用培養基 |
人羊膜細胞WISH(STR鑒定正確) | sh-sy5y轉染突變型人神經母瘤細胞專用培養基 |
小鼠淋巴細胞白血病帶熒光素酶L12+UC（種屬鑒定） | sh-sy5y轉染野生型人神經母瘤細胞專用培養基 |
小鼠B細胞淋巴瘤A20（種屬鑒定） | HMEC-1 細胞專用培養基SIHa人子宮頸鱗癌細胞專用培養基 |
皮膚惡性黑色素瘤細胞SK-MEL-5(STR鑒定正確) | SJSA-1人骨肉瘤細胞專用培養基 |
人食管癌細胞TE-12(STR鑒定正確) | SK-BR-3人乳腺癌細胞專用培養基 |
人類鱗狀上皮舌癌細胞SCC-9 (STR鑒定正確) | SK-BR-3+LUC人乳腺癌細胞專用培養基 |
人卵巢癌腺癌細胞NIH:OVCAR-3(STR鑒定正確) | SW-13人腎上腺皮質小細胞癌細胞 |
細胞復蘇?：
從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞換液?：
吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。
加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。
加入新的培養基。
?細胞傳代?：
當細胞長到80%~90%時，進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。
棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。
做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞凍存?：
選擇對數生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。
加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
