1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
產品名稱 | 人原代胸腺成纖維細胞專用培養基 | 貨號 | GOY-XP3344 |
規格 | 100mL/500mL | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
產品介紹
由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持人原代胸腺成纖維細胞最佳的生長狀態。
本產品中已包含人原代胸腺成纖維細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代胸腺成纖維細胞的培養。
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法：按照對應保存條件保存12個月，配置好的培養基2℃～8℃,保存2個月；
質量控制
人高轉移肝癌細胞 | 兔原代牙齦干細胞專用培養基 |
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人原代淋巴結成纖維細胞專用培養基 | 兔原代骨骼肌微血管內皮細胞專用培養基 |
小鼠腎小管上皮細胞 | 小鼠原代視網膜神經節細胞專用培養基 |
人肺動脈平滑肌細胞 | 人原代腦神經膠質細胞專用培養基 |
人宮頸癌細胞耐藥株 | 小鼠原代心臟微血管內皮細胞專用培養基 |
KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株 | 小鼠原代胃平滑肌細胞專用培養基 |
人視網膜母細胞瘤 | 大鼠原代胚胎成纖維細胞專用培養基 |
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豬小腸上皮細胞 | 人原代胸腺成纖維細胞專用培養基兔原代胃黏膜成纖維細胞專用培養基 |
大鼠腎足細胞 | 小鼠原代胸主動脈平滑肌細胞專用培養基 |
人T淋巴細胞系 | 人原代腎小管上皮細胞專用培養基 |
人骨髓瘤細胞 | 大鼠原代睪丸間質細胞專用培養基 |
人胰腺癌細胞 | 小鼠主動脈血管平滑肌細胞 |
細胞復蘇?：
從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞換液?：
吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。
加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。
加入新的培養基。
?細胞傳代?：
當細胞長到80%~90%時，進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。
棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。
做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞凍存?：
選擇對數生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。
加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
