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幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書

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  • 更新時間2019-03-12
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幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書的AFLP(amplified fragment length polymorphism)原理是一種結合 RFLP 和 PCR 技 術特點的、迄今為止Z有效分子標記分型技術,其原理如下: 本產品在傳統 AFLP-PCR 的基礎上經過精心優化而開發。
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特點:
1. 幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書一站式,足夠 50 次酶切-連接反應、50 次預擴反應和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 體系計算),但不包括 DNA 純化和帶型分析試劑(如 PAGE 電泳試劑和 銀染試劑)。
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技術概論:
幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑。
PCR反應體系與反應條件
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
 幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書性能指標:
1.試劑盒檢測特異性為
2. 檢測試劑盒重現性為
3. 靈敏度可達到103/ml
4. 有效期為6個月
PCR反應五要素: 
幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
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非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A

CLEC4A2OthersRat大鼠CLEC4A2/DCIR人細胞裂解液(陽性對照)

Dami細胞,人巨核細胞保白血病細胞小鼠網織細胞肉瘤,M5076細胞前列腺上皮細胞生長添加物PEpiCGS

NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

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幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

關鍵詞:標準 標準品
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