實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 | 貨號 |
人偏肺病毒PCR熒光定量檢測試劑盒 | Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR | 多種規格 | BJ-P6869 |
特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 ４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。 ６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
|
操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
1瓶 VE株 VE 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Prostaglandin G/H synthase 1
2 ug pBMN-Z pBMN-Z 低溫運輸，-20℃保存 78-5000 pg/mL 金黃菌(SA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
大豆胨酵母浸粉瓊脂（PYE） Phytone Yeast Extract Agar 250g 1.56-100 ng/mL 人再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA試劑盒
5次 cDNA文庫構建試劑盒 cDNA Library Construction Kit Dr. GenTLE Precipitation Carrier 4℃保存，3 M Sodium Acetate（pH5.2） 4℃保存，Spin Column 4℃保存，FALCON Tube 常溫保存，E.coli Electro-Cells -80℃保存，SOC 4℃保存，其他組份-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX
2 ug pGIPZ control pGIPZ control 低溫運輸，-20℃保存 78-5000 pg/mL 人血小板結合蛋白基序的解聚蛋白金屬蛋白18(ADAM-TS 18)ELISA試劑盒
100次 包涵體蛋白溶解及復性套裝 Inclusion Body Protein Solubilization & Refolding Pack 常溫保存 15.6-1000 pg/mL 人鎳紋蛋白(Meteorin)ELISA試劑盒
50T 花生PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
1次 96孔板病毒RNAout（離心法） 96 Microwell Plate Vrial RNAOUT 4℃保存 0.312-20 ng/mL 人硬化蛋白(SOST)ELISA試劑盒
25g 橙黃G鈉 Orange G 室溫保存 0.125-8 ng/mL 人鞘氨醇1酯受體4(S1PR4)ELISA試劑盒
2 ug p426 GAL p426 GAL 低溫運輸，-20℃保存動力鳥培養基進口、國產MIO Medium250克動力、和鳥試驗
50T 魚特定基因序列PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存 0.625-40 ng/ml 人普列克底物蛋白同源域包含家族O成員1(PKHO1)ELISA試劑盒
人偏肺病毒PCR熒光定量檢測試劑盒糊精水溶液(1%) 100ml
蘇丹黑B染色液 2×50ml|2×100ml
蘇丹黑B染色液(細胞專用) 3×20ml|3×50ml
耐爾藍染色液(Cain法) 3×50ml
改良油紅O染色液 2×50ml|2×100ml
磷脂染色液(酸性蘇木紅法) 4×100ml
磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液 3×100ml
姬姆薩染色液(Giemsa stain,即用型) 100ml|500ml
姬姆薩染色液(Giemsa stain,1:9) 100ml|500ml
姬姆薩染色液(10×Giemsa stain) 2×100ml|2×500ml
瑞氏染色液(Wright stain,即用型) 100ml|500ml
