我司供應(yīng)的elisa進口試劑盒免費代測，全程ELISA試劑盒實驗技術(shù)指導，免費代做實驗，索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格：96T/48T
特點：靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學研究，不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human urease related protein C (UreC) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10636 |
備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備：
ELISA進口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2甘氨酰-L-酪氨酸；甘洛二肽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,水合物Glycyl-L-tyrosine
HAoEC Pellet 人主動脈內(nèi)皮細胞團塊 > 1 mio.cells 尿道上皮細胞生長添加物UCGSD-亮氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Leucine
CL-0296MX-1(人癌細胞)5×106cells/瓶×2D-賴氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRH-D-Lys-OH·HCl
MBL1 Others Rat 大鼠 MBL1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-甘露糖(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品D-Mannose
成纖維細胞cDNAHMF cDNAN-辛酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-8)質(zhì)量規(guī)格：≥97% ,進分N-Octanoyl-N-methylglucamine
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-姜酚（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品6-gingerol
人胃腺癌細胞;BGC-8238-姜酚（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品8-Gingerol
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 姜酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Zingerone
CM-H130人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL姜酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%,進口分裝Zingerone
MKN-28細胞，人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,U-2 OS細胞 幼蚊細胞;C6/3610,12-二十九二炔酸(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)10,12-Nonacosadiynoic Acid
RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 RattusTWEEN80吐溫80蛋白組學級4L9005-65-6RT
FETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙(三基硅基)炔 Bis(trimqthylsilyl)ccqtylqnq 14630-40-1
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T12-metxylindole2-甲基吲哚100克BR，48-50℃
EPHA4 Others Human 人 EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) DMSO-DImetxYLSULFOXIDE二甲基亞砜(超)5x10ML67-68-5RT
CL-0380MDA-MB-157(人癌細胞)5×106cells/瓶×2(聚乙二醇4000)
人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)elisa進口試劑盒EPD1 Others Mouse 小鼠 CD39 / EPD1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 順式白藜蘆醇cis-Resveratrol質(zhì)量規(guī)格：美國進口
CL-0089H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞)5×106cells/瓶×2反式白藜蘆醇-4'-硫酸鹽trans Resveratrol-4'-sulfate質(zhì)量規(guī)格：美國進口
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞 非雄激素依賴型前列腺癌,Tsu-Pr1細胞 ZR-75-1(癌細胞)順式白藜蘆醇4'-O-β-D-葡萄糖苷酸cis Resveratrol 4'-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口
小鼠骨髓細胞;FDC-P1順式白藜蘆醇3-O-β-D-葡萄糖苷酸cis Resveratrol 3-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口
SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人細胞裂解液 (陽性對照) 反式白藜蘆醇-3,5-硫酸氫鹽trans Resveratrol-3,5-disulfate質(zhì)量規(guī)格：美國進口
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
