備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水） 
產品名稱 | 人抗角蛋白抗體(AKA)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human anti keratin antibody (AKA) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10513 |
規格：96T/48T
特點：靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究，不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據客戶要求，選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備：
ELISA進口試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片經下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復： 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫度達到 98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復，直接進入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
MelanoFectagen? 色素細胞轉染試劑盒普盧利沙星;普利沙星質量規格：>99%,BRPrulifloxacin
牛腎細胞;MDBK(NBL-1) 人胃癌細胞，NCI-N87細胞 NS-1細胞，小鼠骨髓瘤細胞普盧利沙星;普利沙星(標準品)質量規格：HPLC>98%,標準品Prulifloxacin
EB病毒轉化的人B細胞(彝族);KM9345-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙酸(血清素代謝物)質量規格：>98.0%,進分5-HIAA
SLAMF7 Others Human 人 SLAMF7 / CRACC / CD319 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢地嗪酸;頭孢地嗪酸質量規格：>90%,BRCefodizime acid
CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細胞)5×106cells/瓶×2右美沙芬-d3質量規格：美國進口Dextromethorphan-d3
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL沙門氏志賀氏屬瓊脂培養基5克RT
THP-1人單核白血病細胞 Human側金盞花醇;啊東糖醇;務五醇;福壽草醇;側金盞(務)糖醇;核糖醇 cdonitol;Ribitol 488-81-3
CNAP2 Others Mouse 小鼠 CNAP2 / PR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 4--1-酚 4-Chloro-1-naphthol (≥98%, 4CN) 604-44-4 5G 核酸衍生物
人前列腺成纖維細胞RNAHPrF miRNA5 μgformide,DEIONIZED去離子甲先胺超級無色微粘稠液體COLDsigma
BLNK Others Human 人 BLNK 人細胞裂解液 (陽性對照) Fluorescein2Na 25g/100g/500g 原裝 Amresco 0577
COLGALT2 Others Human 人 GLT25D2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) VANTAGEREVIEWSTRIPPINGBUFFER優勢型剝離試劑500 mlCOLD
CM-H062人腎管狀上皮細胞*培養基100mL2-基-2-丁基-1,3-炳二醇 2-BUTYL-2-qTHYL-1,3-PROPcNqDIOL 112-84-4
Hep-2, 人喉癌細胞系 骨髓瘤,45.6.TG1.7細胞 Hs888Lu(人肺成纖維細胞)D-賴酸鹽酸鹽25克
小鼠網織細胞肉瘤;M5076葡聚糖T750毫克
CD74 Others Human 人 CD74 人細胞裂解液 (陽性對照) ,3-兒價分2,3-DImetxYLpxenOL PESTANAL
人抗角蛋白抗體(AKA)elisa進口試劑盒VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白普魯卡因青霉素GPenicillin G procaine質量規格：美國進口
狗間葉干細胞(脂肪)(5×105) GBC-SD, 人膽囊癌細胞 Human芐星青霉素GPenicillin G benzathine salt質量規格：美國進口
腮腺細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)尼泊金異丁酯-d9Isobutyl-d9 Paraben質量規格：美國進口
TEK Others Mouse 小鼠 Tie2 / TEK 人細胞裂解液 (陽性對照) 尼泊金異丁酯Isobutyl Paraben質量規格：美國進口
大鼠腎小管平滑肌細胞*培養基 100mL尼泊金異丙酯Isopropyl Paraben質量規格：美國進口
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