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熒光定量PCR儀器的耗材更換周期并非固定不變,會受到多種因素影響,以下為你詳細介紹常見耗材的更換周期及相關要點:
反應管
更換周期:通常在使用1 - 2次后建議更換。
影響因素
材質特性:反應管一般有塑料材質等,在PCR反應的高溫變性階段(常達95℃左右),塑料材質會逐漸發(fā)生熱降解,多次使用后可能出現變形、破裂等情況,影響反應體系的密封性,導致液體蒸發(fā)或外界污染進入,從而影響檢測結果。
樣本污染風險:每次使用后,反應管內壁可能殘留樣本核酸、蛋白質等物質,即使經過清洗,也難以去除。這些殘留物可能會對后續(xù)實驗產生交叉污染,干擾檢測結果的準確性。
密封墊或密封膜
更換周期:一般使用1次后即需更換。
影響因素
密封性能:密封墊或密封膜的主要作用是保證反應管在PCR反應過程中的密封性,防止液體蒸發(fā)和外界污染。在一次PCR反應中,密封墊或密封膜會受到高溫和壓力的作用,其密封性能會逐漸下降。如果重復使用,可能會導致密封不嚴,影響反應的穩(wěn)定性和準確性。
材質老化:密封材料在高溫環(huán)境下容易老化變硬,失去彈性,無法緊密貼合反應管,從而影響密封效果。
移液器槍頭
更換周期:每吸取一個樣本或試劑后都應更換。
影響因素
避免交叉污染:在熒光定量PCR實驗中,樣本和試劑的純度和準確性至關重要。使用一次性移液器槍頭可以有效避免不同樣本或試劑之間的交叉污染,保證實驗結果的可靠性。如果重復使用槍頭,可能會導致樣本或試劑的殘留,影響后續(xù)實驗的結果。
保證吸液精度:多次使用后,槍頭內壁可能會殘留液體,影響吸液的精度和準確性,進而影響PCR反應體系中各組分的比例,對實驗結果產生不利影響。
濾芯吸頭(若使用)
更換周期:同樣需每吸取一個樣本或試劑后更換。
影響因素
過濾功能:濾芯吸頭內置的濾芯可以過濾掉樣本或試劑中的顆粒物、氣溶膠等污染物,保護移液器和實驗環(huán)境。一旦使用過,濾芯就可能被污染,失去過濾效果,如果繼續(xù)使用,可能會將污染物帶入新的樣本或試劑中,影響實驗結果。
防止交叉污染:與普通移液器槍頭一樣,濾芯吸頭重復使用也會增加交叉污染的風險,因此必須一次一換。
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