HPASMC：人肺動脈平滑肌細胞復蘇細胞注意事項：
1收到細胞后當天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養基，放進培養箱，第二天再消化。
2邊觀察邊消化，根據細胞的形態，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化。客戶摸索比較好的消化時間。
3隨細胞有一份細胞操作說明書，請客戶仔細查看。
4記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。
5售后時間為一周，于細胞本身的質量問題，而因乙方自己不當操作（不規范操作，消化過度，不加雙抗導致的污染等）導致的細胞問題不在售后范疇。
6收到細胞后，如細胞狀態不佳，或培養中遇到問題，煩請當天盡快，以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據，請您務必重視。
7剛收到細胞時，胎牛血清可以用15%培養兩三天，利于細胞盡快恢復狀態，細胞狀態穩定后，再調回10%即可。
        【產品規格】    1*10（6）
        【安全級別】    1
        【產品種屬】    人
        【組織來源】    肺動脈
        【細胞形態】    成纖維細胞樣
        【細胞特性】    貼壁
        "細胞培養基的選擇和使用：
MEM：成分簡單，貼壁細胞。
DMEM：分高糖型和低糖型。
IDMEM：適合細胞密度低，生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選，DNA轉染后轉化細胞的篩選培養。
RPM1640：應用Z廣泛的培養基之一。懸浮細胞培養，主要針對淋巴細胞，也適合其他細胞。
199、109培養基：成分齊全，培養效果較好。
F10培養基：適合小鼠及人類二倍體細胞培養。
F12培養基：HPASMC：人肺動脈平滑肌細胞適合單細胞分離培養及無血清培養。
         細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
        【培養條件】    詳見細胞說明書
        【傳代方法】    建議1:2-1:3 兩天換液一次
        【凍存條件】    詳見細胞說明書
        【主要文獻】    請具體查閱相關發表文章
細胞凍存及復蘇基本知識普及：
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。
除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結條件下，細胞內水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。 
采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。
HPASMC：人肺動脈平滑肌細胞凍存的步驟
（1）選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養瓶中的細胞培養液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養液。用吸管吸取培養液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘)。
（2）去上清液，加入含20%小牛血清的*培養基，于4℃預冷15分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為5×106～1×107/mL之間。（凍存培養液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養的細胞類型來選擇。
（3）將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記（日期、細胞種類及代次、凍存支數）
（4）將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐。
（5）細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養，觀察生長情況，然后再繼續凍存。
如何進行細胞復蘇：
1. 從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養液，混勻;
3. 離心， 1000rpm，5min;
4. 棄去上清液，加入含10%小牛血清培養液重懸細胞，計數，調整細胞密度，接種培養瓶，37℃培養箱靜置培養;
5. 次日更換一次培養液，繼續培養。
溫馨提醒
1.從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存，但為對數生長期細胞。在凍存前一天換一次培養液;
2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作（戴棉手套），以免凍傷;
3.HPASMC：HPASMC：人肺動脈平滑肌細胞凍存和復蘇用新配制的培養液。
細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經常發生凍存管爆炸，該怎么避免出現這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節要注意的？