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當前位置:上海研生實業有限公司>>PCR類>>核酸純化試劑盒>> 32次石蠟切片(FFPE)核酸提取試劑盒

石蠟切片(FFPE)核酸提取試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號32次

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-21 19:54:13瀏覽次數:577次

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規格 32次/盒 、50次/盒 貨號 YS-P013212
品牌 YSRIBIO
石蠟切片(FFPE)核酸提取試劑盒原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。

服務流程:

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱規格
貨號
石蠟切片(FFPE)核酸提取試劑盒32次/盒 、50次/盒YS-P013212

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
QQ截圖20191211135002.jpg

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

丙型肝炎(HCV)     預分裝磁珠法     丙型肝炎(HCV)核酸提取試劑盒(MB32)

預分裝磁珠法     丙型肝炎(HCV)核酸提取試劑盒(MB96)

預分裝磁珠法     丙型肝炎(HCV)核酸提取試劑盒(MB48)

磁珠法      丙型肝炎(HCV)核酸提取試劑盒

離心柱法     丙型肝炎(HCV)核酸提取試劑盒

地中海貧血基因     預分裝磁珠法     地中海貧血基因提取試劑盒(MB32)

預分裝磁珠法     地中海貧血基因提取試劑盒(MB96)

預分裝磁珠法     地中海貧血基因提取試劑盒(MB48)

磁珠法      地中海貧血基因提取試劑盒

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結核分歧桿菌     預分裝磁珠法     結核分歧桿菌核酸提取試劑盒(MB32)

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磁珠法      結核分歧桿菌核酸提取試劑盒

離心柱法     結核分歧桿菌核酸提取試劑盒

通用型     預分裝磁珠法     通用型基因組DNA提取試劑盒(MB32)

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預分裝磁珠法     通用型基因組DNA提取試劑盒(MB48)

磁珠法      通用型基因組DNA提取試劑盒

離心柱法     通用型基因組DNA提取試劑盒

病毒     預分裝磁珠法     病毒DNA/RNA提取試劑盒(MB32)

預分裝磁珠法     病毒DNA/RNA提取試劑盒(MB96)

預分裝磁珠法     病毒DNA/RNA提取試劑盒(MB48)

磁珠法      病毒DNA/RNA提取試劑盒

離心柱法     病毒DNA/RNA提取試劑盒

phospho-ATG7(Ser95)    磷酸化自噬相關蛋白7抗體

phospho-ATG16A(Ser287)    磷酸化自噬相關蛋白16A抗體

phospho-ATG9A(Ser735)    磷酸化自噬相關蛋白9A抗體

phospho-ATG4D(Ser341)    磷酸化自噬相關蛋白4D抗體

phospho-ATG4D(Ser467)    磷酸化自噬相關蛋白4D抗體

phospho-TEM8 (Tyr382)    磷酸化血管內皮標志物8抗體

phospho-ATG4A(Ser100)    磷酸化自噬相關蛋白4A抗體

phospho-ATG4C(Ser166)    磷酸化自噬相關蛋白4C抗體

phospho-ATG16A(Ser213)    磷酸化自噬相關蛋白16A抗體

phospho-AKT3 (Ser472)    磷酸化蛋白激酶AKT3抗體

phospho-ADRB2 (Ser261)    磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

phospho-AQP2(Ser261)    磷酸化水通道蛋白2抗體

phospho-ATG3 (Tyr18)    磷酸化自噬相關蛋白3抗體

ALDOB    醛縮酶2抗體

AMY2A    胰腺α淀粉酶抗體

ANKRD11    錨蛋白重復結構域蛋白11抗體

phospho-c-ABL1+2 (Tyr393+429)    磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體

phospho-ATF2 (Thr53)    磷酸化活化復制因子2抗體

AKR1D1    醛固酮還原酶家族1成員D1抗體

ARP4    肝血管生成素相關蛋白抗體

ABHD5    自水解酶結構域5蛋白抗體

ACOT8    酰基輔酶A硫酯酶8

Agpat2    溶血磷脂酸酰基轉移酶β抗體

AFP4b    AFP4b蛋白抗體

APOC2    載脂蛋白C2抗體

Apolipoprotein A V    載脂蛋白A5抗體

APOA2    載脂蛋白A2抗體

AGPAT4    溶血磷脂酸酰基轉移酶D抗體

石蠟切片(FFPE)核酸提取試劑盒APOE3    載脂蛋白E3抗體

ABI3    ABI基因家族2抗體

AARE    氧化蛋白質水解酶

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。




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