組成及試劑配制:
1、B組輪狀病毒(HRV-B)核酸檢測試劑盒方法廠家酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

PCOLCE1 ELISA KitBcl-2抗體前膠原C內(nèi)肽酶增強(qiáng)子1(PCOLCE1)ELISA試劑盒

PCP ELISA Kit腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體前膠原C端肽酶(PCP)ELISA試劑盒

Pim1 ELISA Kit膽鹽激活脂肪酶抗體前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒

PA ELISA Kit3-羥丁酸脫氫酶抗體前白蛋白(PA)ELISA試劑盒

CALLA ELISA Kit長鏈脂肪酸酰基輔酶A水解酶抗體普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒

GLUT4 ELISA Kit磷酸化癌易感基因1抗體葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒

GLUT3 ELISA Kit磷酸化β分泌酶抗體葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒

GLUT1 ELISA Kit磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒

GIP ELISA Kit磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒

GOD ELISA Kit磷酸化Bcl-2抗體葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒

GKRP ELISA Kit磷酸化癌易感基因1抗體葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒

GCK ELISA Kit磷酸化癌易感基因1抗體葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒

GPI ELISA Kit磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒

G6PD ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒

G-6-Pase ELISA Kit癌易感基因相互作用蛋白1抗體葡萄糖-6-磷酸酶/葡萄糖-6-磷酸酯酶(G-6-Pase)ELISA試劑盒

SPA ELISA Kit磷酸化癌易感基因相互作用蛋白1抗體葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒

PEPD ELISA Kit磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體脯氨酸肽酶(PEPD)ELISA試劑盒

PHD ELISA Kit磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒

SFPQ ELISA Kit磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體脯氨酸/谷氨酰胺富含性剪接因子(SFPQ)ELISA試劑盒

Tetanus Ab ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)ELISA試劑盒

ODF ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒

PS ELISA Kit磷酸化Bcl-xL蛋白抗體潑尼松龍(PS)ELISA試劑盒

MDH1 ELISA Kit高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體蘋果酸脫氫酶1(MDH1)ELISA試劑盒

SMM ELISA KitB細(xì)胞遷移基因4抗體平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒

SMA ELISA KitBCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體平滑肌肌動(dòng)蛋白(SMA)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。