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產地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 |
組成及試劑配制:
1、漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒方法廠家酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒方法廠家 | 48T | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球將試管塞緊后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數),振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環參數設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
MDP1 ELISA Kit蛙皮素受體3抗體鎂依賴性磷酸酶1(MDP1)ELISA試劑盒
PWM ELISA Kit骨形態發生蛋白8抗體美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒
CED-3 ELISA Kit骨形態發生蛋白6抗體美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA試劑盒
Ank-B ELISA Kit磷酸化Bcl-2抗體錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒
ATM ELISA Kit磷酸化Bcl-2抗體毛細血管擴張性共濟失調突變基因(ATM)ELISA試劑盒
MPA ELISA Kit磷酸化Bcl-xL蛋白抗體麥考酚酸(MPA)ELISA試劑盒
Gliadin-IgA ELISA Kit神經母細胞瘤相關蛋白ARID3B抗體麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒
CLIC4 ELISA Kit微管蛋白β4抗體氯離子胞內通道蛋白4(CLIC4)ELISA試劑盒
OVA sIgG ELISA Kit霍亂腸毒素β鏈抗體卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒
OVA sIgE ELISA Kitβ晶體蛋白B1抗體卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
FSTL-1 ELISA Kit磷酸化Bax抗體卵泡抑素樣蛋白1(FSTL-1)ELISA試劑盒
FS ELISA Kit磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒
LCAT ELISA Kit磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體卵磷脂膽固醇酰基轉移酶(LCAT)ELISA試劑盒
OVX1 ELISA Kit磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體卵巢癌抗原X1(OVX1)ELISA試劑盒
Trx ELISA Kit磷酸化相關死亡促進因子抗體硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒
TXNDC6 ELISA Kit肌動蛋白樣蛋白6A抗體硫氧還蛋白域包含蛋白6(TXNDC6)ELISA試劑盒
TrxR ELISA Kit磷酸化紅細胞陰離子交換蛋白1抗體硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒
HSPG2 ELISA Kit磷酸化紅細胞陰離子交換蛋白1抗體硫酸乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)ELISA試劑盒
MS ELISA Kit障礙自整合蛋白BAF抗體硫酸褪黑色素(MS)ELISA試劑盒
CSPG5 ELISA Kit磷酸化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體硫酸軟骨素蛋白聚糖5(CSPG5)ELISA試劑盒
CSGALNACT1 ELISA Kit磷酸化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體硫酸軟骨素N-乙酰氨半乳糖胺基轉移酶1(CSGALNACT1)ELISA試劑盒
CS ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體硫酸軟骨素(CS)ELISA試劑盒
DSCSPG ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體硫酸皮膚素-硫酸軟骨素PG(DSCSPG)ELISA試劑盒
DS ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體硫酸皮膚素(DS)ELISA試劑盒
SFT ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體硫酸腦苷酯(SFT)ELISA試劑盒
HS/HPS ELISA Kit轉錄調節蛋白BACH2抗體硫酸類肝素(HS/HPS)ELISA試劑盒
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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