選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價。
產(chǎn)品名稱：大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa試劑盒
英文名稱：Rat cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月(4℃)；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥98%　戊糖片球菌　25g

熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥98%　流產(chǎn)布魯氏菌 生物Ⅵ型　5g

白介素18(IL18)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　96%　變紫青霉　1g

干擾素α(IFNα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　96%　尖孢鐮刀菌胡麻專化型　1g

蛋白酪氨酸磷酸酶受體H(PTPRH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　96%　梨形毛霉　25g

2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　96%　屎腸球菌　5g

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(CEBPβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　中慢生華癸根瘤菌　5g

Toll樣受體9(TLR9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　枯草芽孢桿菌　100ml

Toll樣受體9(TLR9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　凍干補(bǔ)體　25ml

生長激素(GH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　美澳型核果褐腐病菌　1g

胰島素樣生長因子1(IGF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　Paenibacillus　25g

堿性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　大腸埃希菌　5g

免疫球蛋白G(IgG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥98%　大腸埃希菌　1g

血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥98%　大腸埃希菌　25g

C反應(yīng)蛋白(CRP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥98%　黃硬皮馬勃　5g

轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　柱孢綠僵菌　1g

白血病抑制因子(LIF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　美麗胡枝子根瘤菌　5g

白介素3(IL3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　10.0μg/g　棉阿舒囊霉　1ml
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa試劑盒細(xì)胞衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色（與紅細(xì)胞無法分別）　LILRB5 　100 ug

全組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色　LIMK1(LIM domain kinase 1) 　100 ul

冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色　LIMS1 　100 ul

石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位間接染色　LIMK2 　300 ul

石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位直接染色　LGI3 　5 mg

細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）染色　LGI2 　100 ul

全組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）染色　LGI2 　300 ul

冰凍切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）染色　LIMS1 　100 ul

石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）間接染色　LIMK2 　200 ml

石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）直接染色　LGP2 　100 ul

細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素高酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位染色　LGI3 　500 ul

全組織衰老特異性晚期脂褐素高酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位染色　LGR5 　100 ul

冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素高酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位染色　LGR6 　100 ul

石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素高酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位間接染色　LDLRAD1 　100 ul

石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素高酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位直接染色　LCOR 　100 ul

P16蛋白表達(dá)西方雜交分析　LDOC1 　1 liter
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。