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11超級細菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新時間:2019-04-18 11:06:07瀏覽次數(shù):192次

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elisa檢測試劑盒
ATCC細胞
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PCR試劑盒
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感覺態(tài)細胞
PCR檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
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生化檢測試劑盒
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產(chǎn)地 進口 加工定制
11超級細菌PCR檢測試劑盒說明書:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

組成及試劑配制:
1、11超級細菌PCR檢測試劑盒說明書酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

產(chǎn)品名稱英文名稱價格
11超級細菌PCR檢測試劑盒說明書Abalone Spherical VirusPCR電詢


樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。

MT1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體58抗體金屬硫蛋白1(MT1)ELISA試劑盒
MPPE1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體128抗體金屬磷酸酯酶1(MPPE1)ELISA試劑盒
MPS1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體128抗體金屬泛激蛋白1(MPS1)ELISA試劑盒
ADAM9 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體146抗體解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒
ADAM8 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體146抗體解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒
ADAM33 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體17抗體解整合素金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒
ADAM28 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體19抗體解整合素金屬蛋白酶28(ADAM28)ELISA試劑盒
ADAM22 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體20抗體解整合素金屬蛋白酶22(ADAM22)ELISA試劑盒
ADAM19 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體21抗體解整合素金屬蛋白酶19(ADAM19)ELISA試劑盒
ADAM17 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體22抗體解整合素金屬蛋白酶17(ADAM17)ELISA試劑盒
ADAM15 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體25抗體解整合素金屬蛋白酶15(ADAM15)ELISA試劑盒
ADAM12 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體26抗體解整合素金屬蛋白酶12(ADAM12)ELISA試劑盒
ADAM10 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體27抗體解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒
DSTN ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體3抗體解聚蛋白(DSTN)ELISA試劑盒
MACC1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體31抗體結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移關(guān)聯(lián)基因1(MACC1)ELISA試劑盒
PER1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體32抗體節(jié)律晝夜蛋白1(PER1)ELISA試劑盒
CNTNAP4 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體34抗體接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)ELISA試劑盒
CNTNAP2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體35抗體接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)ELISA試劑盒
CNTNAP1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體37/帕金森相關(guān)內(nèi)皮素受體樣受體抗體接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白1(CNTNAP1)ELISA試劑盒
CNTN6 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體40抗體接觸蛋白6(CNTN6)ELISA試劑盒
CNTN5 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體43抗體接觸蛋白5(CNTN5)ELISA試劑盒
CNTN4 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體44抗體接觸蛋白4(CNTN4)ELISA試劑盒
CNTN3 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體45抗體接觸蛋白3(CNTN3)ELISA試劑盒
CNTN2 ELISA Kit同源盒蛋白GSC抗體接觸蛋白2(CNTN2)ELISA試劑盒
CNTN1 ELISA Kit脊髓性肌癥蛋白Gemin4抗體接觸蛋白1(CNTN1)ELISA試劑盒
SCCPDH ELISA Kit脊髓性肌癥蛋白Gemin5抗體酵母氨酸脫氫酶(SCCPDH)ELISA試劑盒
CAV3 ELISA Kit脊髓性肌癥蛋白Gemin7抗體窖蛋白3(CAV3)ELISA試劑盒
CAV2 ELISA KitGTP結(jié)合絲裂原誘導T細胞蛋白抗體窖蛋白2(CAV2)ELISA試劑盒
CAV1 ELISA Kit染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體窖蛋白(CAV1)ELISA試劑盒
TGM1 ELISA Kit脊髓性肌癥蛋白Gemin6抗體角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM1)ELISA試劑盒
SQLE ELISA Kit磷酸化膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體角鯊烯單加氧酶(SQLE)ELISA試劑盒
KERA ELISA Kit自主生長因子GFI1抗體角膜蛋白(KERA)ELISA試劑盒
CDSN ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體角化粒(CDSN)ELISA試劑盒
CNFN ELISA Kitγ-銜接蛋白相關(guān)蛋白1抗體角化蛋白(CNFN)ELISA試劑盒
DKC ELISA Kitγ-銜接蛋白相關(guān)蛋白2抗體角化不良蛋白(DKC)ELISA試劑盒
KRT9 ELISA Kitγ-銜接蛋白相關(guān)蛋白3抗體角蛋白9(KRT9)ELISA試劑盒
KRT81 ELISA Kit配子生成素抗體角蛋白81(KRT81)ELISA試劑盒

 

反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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