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恩杜姆病毒PCR檢測試劑盒品牌

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更新時間:2019-04-18 10:48:14瀏覽次數(shù):299次

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恩杜姆病毒PCR檢測試劑盒品牌:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

組成及試劑配制:
1、恩杜姆病毒PCR檢測試劑盒品牌酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

產(chǎn)品名稱英文名稱價格
恩杜姆病毒PCR檢測試劑盒品牌Abalone Spherical VirusPCR電詢


樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴增反應(yīng)。
4. PCR擴增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。

MECP2 ELISA Kit谷氨酸受體紅藻氨酸離子1抗體甲基CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)ELISA試劑盒
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DCP2 ELISA Kit棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶GODZ抗體加帽酶2(DCP2)ELISA試劑盒
SPON2 ELISA KitG蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體脊椎蛋白2(SPON2)ELISA試劑盒
SPON1 ELISA KitG氨基丁酸受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體脊椎蛋白1(SPON1)ELISA試劑盒
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EML2 ELISA Kitβ1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶6抗體棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2)ELISA試劑盒
KNG1 ELISA Kit?;撬?β-氨基乙磺酸抗體激肽原1(KNG1)ELISA試劑盒
PK ELISA Kit赤霉素抗體激肽釋放酶原(PK)ELISA試劑盒
KAL ELISA Kit鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白X抗體激肽釋放酶結(jié)合蛋白(KAL)ELISA試劑盒
KLK9 ELISA KitGRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體激肽釋放酶9(KLK9)ELISA試劑盒
KLK8 ELISA Kitγ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈2抗體激肽釋放酶8(KLK8)ELISA試劑盒
KLK7 ELISA Kit原鈣粘蛋白γA1抗體激肽釋放酶7(KLK7)ELISA試劑盒
KLK6 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體70抗體激肽釋放酶6(KLK6)ELISA試劑盒
KLK5 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體71抗體激肽釋放酶5(KLK5)ELISA試劑盒
KLK4 ELISA Kit谷氨酸受體δ2/GluR-δ2抗體激肽釋放酶4(KLK4)ELISA試劑盒
KLK3 ELISA Kit血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體激肽釋放酶3(KLK3)ELISA試劑盒
KLK2 ELISA Kit谷氨酸脫羧酶67抗體激肽釋放酶2(KLK2)ELISA試劑盒
KLK15 ELISA Kit生長抑制DNA損傷基因45抗體激肽釋放酶15(KLK15)ELISA試劑盒
KLK14 ELISA Kit胃泌素抑制肽抗體激肽釋放酶14(KLK14)ELISA試劑盒
KLK13 ELISA Kit葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4抗體激肽釋放酶13(KLK13)ELISA試劑盒

 

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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