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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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蟾分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書

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更新時(shí)間:2019-04-18 10:22:26瀏覽次數(shù):208次

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elisa檢測(cè)試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
PCR試劑盒
培養(yǎng)基
感覺態(tài)細(xì)胞
PCR檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
熒光定量PCR試劑盒
試劑盒
進(jìn)口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測(cè)試劑盒
科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
蟾分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。

組成及試劑配制:
1、蟾分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

產(chǎn)品名稱英文名稱價(jià)格
蟾分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書Abalone Spherical VirusPCR電詢


樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。

ERRα ELISA Kit高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體雌激素受體相關(guān)受體α(ERRα)ELISA試劑盒
ERβ ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α抗體雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒
ERα ELISA Kit熱休克蛋白β7抗體雌激素受體α(ERα)ELISA試劑盒
PTTG1IP ELISA KitE3連接酶抑制素受體2抗體垂體腫瘤轉(zhuǎn)化1相互作用蛋白(PTTG1IP)ELISA試劑盒
PACAPR ELISA Kit透明質(zhì)酸及粘蛋白3抗體垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體(PACAPR)ELISA試劑盒
ADCYAP1 ELISA Kit22號(hào)染色體開放閱讀框28抗體垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA試劑盒
PRF1 ELISA Kit14號(hào)染色體開放閱讀框94抗體穿孔素1(PRF1)ELISA試劑盒
HPR ELISA Kit四磷酸鳥苷水解酶抗體觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒
AMBN ELISA Kit人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗體成釉細(xì)胞蛋白(AMBN)ELISA試劑盒
FGFRL1 ELISA Kit激素上調(diào)神經(jīng)腫瘤相關(guān)激酶抗體成纖維細(xì)胞生長因子受體樣蛋白1(FGFRL1)ELISA試劑盒
FGFR4 ELISA Kitβ氨基己糖苷酶A抗體成纖維細(xì)胞生長因子受體4(FGFR4)ELISA試劑盒
FGFR3 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白HECW1抗體成纖維細(xì)胞生長因子受體3(FGFR3)ELISA試劑盒
FGFR2 ELISA Kit3-羥氨苯甲酸雙加氧酶抗體成纖維細(xì)胞生長因子受體2(FGFR2)ELISA試劑盒
FGFR1 ELISA Kit舞蹈癥相關(guān)蛋白40/凝血因子8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體成纖維細(xì)胞生長因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒
FGF7 ELISA Kit舞蹈癥相關(guān)相互作用蛋白1/雌激素相關(guān)受體樣蛋白1抗體成纖維細(xì)胞生長因子7(FGF7)ELISA試劑盒
FGF5 ELISA Kit舞蹈癥蛋白相互作用蛋白13抗體成纖維細(xì)胞生長因子5(FGF5)ELISA試劑盒
FGF3 ELISA Kit神經(jīng)性舞蹈病蛋白抗體成纖維細(xì)胞生長因子3(FGF3)ELISA試劑盒
FGF21 ELISA Kit舞蹈癥相關(guān)蛋白1抗體成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21)ELISA試劑盒
FGF19 ELISA Kit亨廷頓相互作用蛋白1抗體成纖維細(xì)胞生長因子19(FGF19)ELISA試劑盒
FGF18 ELISA Kit葡萄糖氧化酶1抗體成纖維細(xì)胞生長因子18(FGF18)ELISA試劑盒
FGF17 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子HOXD9抗體成纖維細(xì)胞生長因子17(FGF17)ELISA試劑盒
FGF13 ELISA Kit羥基酰谷胱甘肽水解酶樣蛋白抗體成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF13)ELISA試劑盒
FGF12 ELISA Kit熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體成纖維細(xì)胞生長因子12(FGF12)ELISA試劑盒
FGF11 ELISA KitHeme結(jié)合蛋白2抗體成纖維細(xì)胞生長因子11(FGF11)ELISA試劑盒
FAPα ELISA Kit肝細(xì)胞粘附分子2抗體成纖維細(xì)胞激活蛋白α(FAPα)ELISA試劑盒
NBL1 ELISA Kit氨基己糖苷酶D抗體成神經(jīng)細(xì)胞瘤抑制瘤變蛋白1(NBL1)ELISA試劑盒
MyoD ELISA KitHHLA2蛋白抗體成肌分化蛋白(MyoD)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

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