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麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書

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所  在  地上海市

更新時間:2019-04-18 10:27:54瀏覽次數:253次

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麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

組成及試劑配制:
1、麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

產品名稱英文名稱價格
麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書Abalone Spherical VirusPCR電詢


樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球將試管塞緊后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數),振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環參數設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。

Smad7 ELISA Kit胰島素受體抗體Smad同源物7(Smad7)ELISA試劑盒
Smad4 ELISA Kit胰島素受體α抗體Smad同源物4(Smad4)ELISA試劑盒
Smad3 ELISA Kit胰島素受體β抗體Smad同源物3(Smad3)ELISA試劑盒
Smad1 ELISA KitKB抑制蛋白激酶α/β抗體Smad同源物1(Smad1)ELISA試劑盒
Slit3 ELISA Kit白介素12抗體Slit同源物3(Slit3)ELISA試劑盒
Slit2 ELISA Kit干擾素誘導35蛋白抗體Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒
Slit1 ELISA Kit完整膜蛋白E25A抗體Slit同源物1(Slit1)ELISA試劑盒
SSH3 ELISA Kit小腸型脂肪酸結合蛋白抗體Slingshot同源物3(SSH3)ELISA試劑盒
SSH2 ELISA Kit胰島素降解酶抗體Slingshot同源物2(SSH2)ELISA試劑盒
SSH1 ELISA KitKB抑制蛋白激酶β抗體Slingshot同源物1(SSH1)ELISA試劑盒
SFXN5 ELISA Kit白介素17受體D抗體Sideroflexin5蛋白(SFXN5)ELISA試劑盒
SFXN4 ELISA Kit白介素-17B抗體Sideroflexin4蛋白(SFXN4)ELISA試劑盒
SFXN3 ELISA Kit吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體Sideroflexin3蛋白(SFXN3)ELISA試劑盒
SFXN2 ELISA Kit白細胞介素4受體抗體IL-4RαSideroflexin2蛋白(SFXN2)ELISA試劑盒
SFXN1 ELISA Kit白介素2受體γ鏈抗體Sideroflexin1蛋白(SFXN1)ELISA試劑盒
Shootin1 ELISA Kit白介素1受體1抗體Shootin1蛋白(Shootin1)ELISA試劑盒
SHISA5 ELISA Kit白介素1受體2抗體Shisa同源物5(SHISA5)ELISA試劑盒
SHC4 ELISA Kit白介素20受體α鏈抗體SHC-轉化蛋白4(SHC4)ELISA試劑盒
SHC3 ELISA Kit白介素20受體β鏈抗體SHC-轉化蛋白3(SHC3)ELISA試劑盒
SHC2 ELISA Kit吲哚乙酸抗體/植物生長素抗體SHC-轉化蛋白2(SHC2)ELISA試劑盒
SHC1 ELISA Kit整合素α6抗體SHC-轉化蛋白1(SHC1)ELISA試劑盒
SESN3 ELISA Kit擬南芥IKI3抗體Sestrin3蛋白(SESN3)ELISA試劑盒
SESN2 ELISA Kit白細胞介素5抗體Sestrin2蛋白(SESN2)ELISA試劑盒
SESN1 ELISA Kit白介素-1受體相關激酶1抗體Sestrin1蛋白(SESN1)ELISA試劑盒
Ses1 ELISA Kit整合素α5抗體Integrin α5Sesquipedalian1蛋白(Ses1)ELISA試劑盒
SRRT ELISA Kit整合素β1/Integrin β1抗體Serrate蛋白(SRRT)ELISA試劑盒
SNTN ELISA Kit整合素αVβ3抗體Sentan蛋白(SNTN)ELISA試劑盒
SETX ELISA Kit胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗體Senataxin蛋白(SETX)ELISA試劑盒
SCEL ELISA Kit甲型流感病毒血凝素抗體Sciellin蛋白(SCEL)ELISA試劑盒
SATB1 ELISA Kit甲型流感病毒血凝素抗體SATB同源框蛋白1(SATB1)ELISA試劑盒
SRYP ELISA Kit整合素αVβ5抗體Sarcosynapsin蛋白(SRYP)ELISA試劑盒
Salusinβ ELISA Kit干擾素調節因子1抗體Salusinβ蛋白(Salusinβ)ELISA試劑盒
Salusinα ELISA Kit白介素6Salusinα蛋白(Salusinα)ELISA試劑盒
STH ELISA Kitγ干擾素誘導蛋白16抗體Saitohin蛋白(STH)ELISA試劑盒
SACS ELISA Kit整合素αVβ1抗體Sacsin蛋白(SACS)ELISA試劑盒
S100B ELISA Kit白細胞介素-20抗體S100鈣結合蛋白B(S100B)ELISA試劑盒
S100A9 ELISA Kit干擾素相關發育調節因子2抗體S100鈣結合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒
S100A8 ELISA Kit白介素-1受體相關激酶2抗體S100鈣結合蛋白A8(S100A8)ELISA試劑盒
S100A7 ELISA Kit磷酸化胰島素受體β抗體S100鈣結合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒
S100A6 ELISA Kit磷酸化胰島素受體β抗體S100鈣結合蛋白A6(S100A6)ELISA試劑盒
S100A5 ELISA Kit整合素alpha E2 抗體S100鈣結合蛋白A5(S100A5)ELISA試劑盒

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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