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石膏樣小孢子菌PCR檢測試劑盒價格

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所  在  地上海市

更新時間:2019-04-17 10:43:18瀏覽次數:209次

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石膏樣小孢子菌PCR檢測試劑盒價格保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

組成及試劑配制:
1、石膏樣小孢子菌PCR檢測試劑盒價格酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

產品名稱英文名稱價格
石膏樣小孢子菌PCR檢測試劑盒價格Abalone Spherical VirusPCR電詢


樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球將試管塞緊后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數),振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環參數設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。

跨膜硫酸軟骨素蛋白聚糖C抗體
神經腫瘤Nova1抗原抗體抗體
B淋巴細胞鏈接激活蛋白抗體
中性鞘磷脂2抗體
核受體蛋白NR2E1抗體
神經外營養蛋白2抗體
腦特異性蛋白BPX抗體
核纖層蛋白A識別因子抗體
NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體
神經元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關蛋白抗體
神經元Y連鎖蛋白抗體
神經連接蛋白2抗體
NIPA樣蛋白3抗體
軸突生長誘導因子3抗體
軸突蛋白3抗體
1號染色體開放閱讀框63抗體
神經元特異性蛋白家族成員2抗體
神經前體細胞發育下調蛋白4抗體
泛素結合酶E2F抗體
鼻咽癌相關蛋白6抗體
神經氨酸酶4抗體
N-乙酰氨基葡萄糖激酶抗體
核因子1B抗體
維甲酸誘導神經母細胞瘤蛋白1抗體
轉錄延伸因子NELF抗體
蛋白激酶C結合蛋白NELL1抗體
蛋白激酶C結合蛋白NELL2抗體
腦特異性跨膜蛋白抗體
核因子1A抗體
環一螺旋蛋白1抗體
腫瘤轉移抑制基因H4抗體
神經元衍生孤兒受體1抗體
軸突生長誘向因子4抗體
脊髓灰質炎病毒受體相關蛋白4抗體
細胞核因子/k基因結合核因子 p52/p100抗體
線粒體復合物NDUFS7蛋白抗體
尼曼匹克C2前體蛋白抗體
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸酶1抗體
一氧化氮合成酶-1抗體
轉錄因子相關蛋白NKX6.1抗體
造血蛋白1抗體
骨巢蛋白抗體
NUP54抗體
親核素β1抗體
谷氨酸受體NMDAζ1抗體

反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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